[发明专利]一种利用限制性内切酶处理DNA模板以增进DNA扩增效率的方法无效

专利信息
申请号: 200710057926.4 申请日: 2007-07-03
公开(公告)号: CN101113435A 公开(公告)日: 2008-01-30
发明(设计)人: 孟良玉;李静;阎大伟;张治洲 申请(专利权)人: 天津科技大学
主分类号: C12N15/09 分类号: C12N15/09;C12Q1/68
代理公司: 天津盛理知识产权代理有限公司 代理人: 王来佳
地址: 300457天津市天*** 国省代码: 天津;12
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摘要: 发明涉及一种应用限制性内切酶处理DNA模板以增进聚合酶链式反应扩增效率的方法,该方法采用限制性内切酶处理DNA模板,通过对待扩增DNA模板的酶切实现对难以扩增的DNA片段的有效扩增,从而提高目的DNA片段的扩增特别是高GC含量片段的扩增,且效果明显,使用简便,易于掌握,较好地解决了某些目的DNA片段扩增效率不高或不易扩增的关键问题。
搜索关键词: 一种 利用 限制性 内切酶 处理 dna 模板 增进 扩增 效率 方法
【主权项】:
1.一种利用限制性内切酶处理DNA模板以增进DNA扩增效率的方法,其特征在于:增进DNA扩增效率的方法是:(1).DNA模板的酶切分析将待扩增区间的模板序列输入任意内切酶分析软件中,进行对本区间序列没有酶切位点的限制性内切酶分析,从而找出对该区间序列没有酶切位点的限制性内切酶名单;(2).DNA模板的酶切从上述限制性内切酶名单中选择限制性内切酶处理DNA模板,实施单酶切或组合酶切。(3).PCR体系的配置;(4).PCR条件的设定与运行;(5).PCR产物检测:对扩增好的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,检查扩增片段在凝胶中的位置,并与相应的分子量标准做对照。
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