[发明专利]铁皮石斛四倍体的培育方法

摘要

本发明涉及一种铁皮石斛四倍体的培育方法。常规铁皮石斛开花后采用人工方法授粉，将其种子接种在1/2MS液体培养基中非共生萌发培养时，再转入含有0.01％Oryzalin+0.01％秋水仙碱的1/2MS液体培养基中进行诱变处理，然后转入1/2MS固体培养基上，光照；取新生长的根尖固定，用压片法制备染色体标本，卡宝品红染色液染色，染色体数目为2n＝76的幼苗为四倍体铁皮石斛，按通常方法进行栽培管理。本发明大幅度地提高了铁皮石斛的药材产量。培育方法简单易行，诱变频率达到80％以上，一次就可以获得数百株四倍体铁皮石斛种苗，满足多倍体选种之用，使多倍体育种成为铁皮石斛遗传改良、新品种培育的重要方法。

主权项

1.一种铁皮石斛四倍体的培育方法，其特征在于包括以下步骤：按常规方法进行铁皮石斛栽培管理，开花后采用人工方法授粉，取授粉后的铁皮石斛种子接种在1/2MS液体培养基中非共生萌发培养至种子原球茎呈球形时，再转入含有0.01％Oryzalin+0.01％秋水仙碱的1/2MS液体培养基中进行诱变处理，然后转入1/2MS固体培养基上，在光照条件下继续培养成苗分化；取新生长的根尖放入对二氯代苯饱和水溶液中前处理，后转入甲醇：冰醋酸固定液中固定，用压片法制备染色体标本，卡宝品红染色液染色，选取染色体数目为2n＝76的幼苗为加倍成功的四倍体铁皮石斛，按通常铁皮石斛管理方法进行栽培管理。