[发明专利]大黄柳叶黄酮成分的提取分离方法

摘要

本发明涉及一种大黄柳叶黄酮成分的提取分离方法，分别对提取方法和分离方法进行考察，确定了乙醇的提取条件、乙醚萃取用量、水饱和正丁醇萃取用量；比较了大黄柳叶黄酮类化合物结构与硅胶薄层层析、葡聚糖凝胶薄层层析、聚酰胺薄层层析行为的关系，并分析了黄酮类化合物结构与制备型高效液相色谱的色谱行为关系，确定了经典柱层析结合现代液相色谱技术--制备型高效液相色谱法分离纯化结构相近的黄酮化合物。本发明有益的效果是：可应用于工业化生产，材料可回收再利用，无毒、无污染。建立的高效液相色谱法快速、简便、方法重现性好、可操作性强，适用于大黄柳叶中黄酮类化合物的定量分析，为控制大黄柳叶的质量及其产品质量提供了可行的检测手段和理论依据。

主权项

1、一种大黄柳叶黄酮成分的提取分离方法，其特征在于：所述的提取分离工艺主要步骤如下：(1.1)样品提取：大黄柳叶晒干后粉碎成粗粉，加入乙醇浸泡后微波提取，提取温度为中高火，过滤后合并提取液，减压浓缩成浓浸膏；用3倍量体积的水溶解后用等体积的乙醚萃取，合并水层，弃去乙醚层；水层再用3/4体积的水饱和正丁醇萃取，直至水饱和正丁醇萃取完全；正丁醇萃取相减压回收溶剂，浸膏溶于水上大孔吸附树脂，用30％的乙醇洗脱；(1.2)黄酮类化合物的分离将大孔吸附树脂30％乙醇洗脱液浓缩与聚酰胺粉混匀干燥，干法上样于聚酰胺柱，分别用体积百分比30％和40％乙醇梯度洗脱，将30％和40％的流份浓缩后静置，产生了浅黄色絮状和颗粒状沉淀；将这两种沉淀分别用乙醇重结晶，得化合物1和化合物2；30％和40％乙醇上清液回收溶剂后冻干成粉末，利用制备型高效液相色谱进一步分离纯化，在高效液相色谱上以甲醇和水为流动相，制备柱为Zorbax SB C18，流速为4.0ml/min，进样浓度为10mg/ml，进样量为500μl-1000μl，当甲醇∶水为40∶60(v/v)时，得到了单体化合物3、化合物4和化合物9，当甲醇∶水为38∶62(v/v)时，得到了单体化合物5、化合物6、化合物7和化合物8。