[发明专利]实时荧光定量PCR检测表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的试剂盒

摘要

本发明涉及一种实时荧光定量PCR检测表皮生长因子受体III型突变体的试剂盒。试剂盒以逆转录mRNA样品得到的cDNA为模板，结合实时荧光PCR检测技术，主要用于定量测定表皮生长因子受体III型突变体mRNA在各种肿瘤组织中的表达水平。该试剂盒具有以下优点：1.准确性高：标准品质粒测定得出的标准曲线，可以精确了解某样本中所含模板的拷贝数。2.特异性高：荧光标记探针的引入可以大大提高扩增的特异性，而且标准品质粒经测序鉴定，使结果更为可信。3.高通量：高特异性探针的引入使扩增反应和鉴定过程一步完成，软件一次可输出多样本数据，大大提高了工作效率，也为大样本的测定提供了可能。

主权项

1.实时荧光定量PCR检测表皮生长因子受体III型突变体的试剂盒，含有聚合酶链反应液、耐热DNA聚合酶、标准品和对照品，其特征是：聚合酶链反应液含有聚合酶链反应缓冲液、MgCl2、dNTPs、检测用引物、荧光探针，检测用引物分检测用上游引物和检测用下游引物，其中：上游引物序列为：5`-GGG CTC TGG AGG AAA AGA AAG G-3`下游引物序列为：5`-TCC GTT ACA CAC TTT GCG GC-3`荧光探针序列为：5`-FAM-CGA CAG CTA TGA GAT GGA GGA AGACGG CGT-TAMRA-3`标准品序列包括两端EcoRI酶切位点，为：GAATTCGATT TCCGTTACAC ACTTTGCGGC AAGGCCCTTCGCACTTCTTA CACTTGCGGA CGCCGTCTTC CTCCATCTCATAGCTGTCGG CCCCACAGGC TCGGACGCAC GAGCCGTGATCTGTCACCAC ATAATTACCT TTCTTTTCCTCCAGAGCCC AATCACTAGT GAATTC。