[发明专利]九孔鲍NF－κB抗体的制备及其检测方法无效
| 申请号： | 200710070419.4 | 申请日： | 2007-08-03 |
| 公开（公告）号： | CN101205254A | 公开（公告）日： | 2008-06-25 |
| 发明（设计）人： | 吴信忠;姜玉声;吴刘记 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;G01N33/53 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 | 代理人： | 陈祯祥 |
| 地址： | 310027浙江省杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 九孔鲍NF－κB(Ab－Rel)抗体的制备及其检测方法。按Ab－Rel全长cDNA序列，设计用于扩增RHD和TD片段的寡聚核苷酸引物，获得编码框表达载体pGEX－RHD和pGEX－TD；转化大肠杆菌重组蛋白的表达与鉴定，经凝胶亲和柱纯化后，注射家兔得到Ab－Rel的RHD和TD两个多克隆抗体，用间接夹心ELISA检测抗体的效价；用两种抗体对Ab－Rel的RHD和TD进行蛋白印迹(Western blotting)检测；亦可利用双抗体与二抗联用间接夹心酶联免疫反应试验(ELISA)检测Ab－Rel的RHD和TD。本发明提供一种对养殖贝类，特别是九孔鲍免疫因子的检测技术。 | ||
| 搜索关键词： | 九孔 nf 抗体 制备 及其 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.九孔鲍NF-κB抗体的制备方法，其特征是包括以下操作步骤：(1)按克隆出的由SEQNO1和SEQNO2记载的九孔鲍NF-κB基因全长序列设计的用于扩增RHD和TD片段的寡聚核苷酸引物：RHD：pRf：AGGATCCGAACCAGCACCTCAGCAA和pRr：ACTCGAGCGGCATGTAAGTGAACGGAAT；TO：TDf：AGGATCCGCAGCCCACTTTGTTCAG和TDr2：ACTCGAG CCATGTCGATGGTGTCG；(2)构建表达载体pGEX-RHD和pGEX-TD，转化大肠杆菌BL21；(3)表达载体经谷胱甘肽GST凝胶亲和柱纯化后，分别注射家兔得到相应的抗九孔鲍NF-κB的RHD和TD的两个多克隆抗体。
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