[发明专利]一种周质分泌融合表达型前T载体及其制备与应用有效
| 申请号： | 200710071214.8 | 申请日： | 2007-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN101381739A | 公开（公告）日： | 2009-03-11 |
| 发明（设计）人： | 林陈水;于真真;杨丹燕;许明;任慧颖 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 | 代理人： | 黄美娟;袁木棋 |
| 地址： | 310014*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种周质分泌融合表达型前T载体，由如下方法制备得到：(1)构建编码BspTI-GSGSG-HHHHHH-XcmI-Ampr-XcmI-HindIII的DNA1片段；(2)定点突变pET39质粒中LacI基因内部的三个XcmI位点，在编码氨基酸序列不变的情况下，改变DNA序列，使XcmI识别位点丧失，得到定点突变消除XcmI位点的pET39’；(3)利用BspTI和HindIII将DNA1定向重组于pET39’中，得到所述周质分泌融合表达型前T载体。本发明除了使用XcmI制备线形T载体外，不需要用其它限制性内切酶，一步法构建融合表达基因工程菌，为大量制备活性肽工程菌库提供了可行的技术方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分泌 融合 表达 载体 及其 制备 应用 | ||
【主权项】：
1. 一种周质分泌融合表达型前T载体，由如下方法制备得到:(1)构建编码BspTI-GSGSG-HHHHHH-XcmI-Ampr-XcmI-HindIII的DNA片段——DNA1；(2)定点突变pET39质粒中LacI基因内部的三个XcmI位点，在编码氨基酸序列不变的情况下，改变DNA序列，使XcmI识别位点丧失，得到定点突变消除XcmI位点的pET39’；(3)利用BspTI和HindIII将DNA1定向重组于pET39’中，得到所述周质分泌融合表达型前T载体。
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