[发明专利]一种同位素188Re标记的单克隆抗体及应用

摘要

本发明提供一种用同位素¹⁸⁸Re标记的单克隆抗体，即¹⁸⁸Re－2E9/13F(ab)₂。通过将¹⁸⁸Re标记至2E9/13单抗上经透析，纯化，浓缩，过滤后制备获得。本发明结合生物学和核医学方法，采用直接标记法将同位素¹⁸⁸Re和抗猪MHC－II特异性单克隆抗体结合在一起，制备出核素标记的抗体，体外活细胞实验和动物实验证实该抗体对急性排斥反应的有抑止作用。本发明解决了永久性下调同种异体MHCII类抗原的免疫原性问题，方法可行性强，具有更强的实用性和有效性，为下一步动物体内实验和最终应用于临床提供了基础。

主权项

1.一种同位素188Re标记的单克隆抗体，即188Re-2E9/13 F(ab)2，通过以下技术方案实现：(1)通过木瓜蛋白酶水解2E9/13单抗后提取其中的F(ab)2片段，并经过过滤，纯化，浓缩，置于-20℃冰箱中保存；(2)Na188ReO4的还原：取柠檬酸-酒石酸混合溶液(pH4.4，柠檬酸0.015M，酒石酸0.15M)0.5mL，加入按照SnCl2·2H2O 20g/L配制的SnCl2溶液，加入新从188W-188Re发生器上淋洗下来的Na188ReO4的生理盐水溶液0.3mL，～1.3mCi，50,000kBq，于室温下反应40min即得188Re还原液；(3)2E9/13抗体的还原：取2E9/13 F(ab)2溶液0.3mL，加入pH5.2的抗坏血酸的PBS溶液0.2mL，40mgVc/mL，于室温下反应30min，即得2E9/13 F(ab)2抗体还原液；(4)2E9/13 F(ab)2抗体的188Re标记：合并上述步骤1、2中的188Re还原液和2E9/13 F(ab)2抗体还原液，于室温下反应2小时，即得188Re标记2E9/13 F(ab)2单抗溶液，活度计测量标记溶液的放射性活度。