[发明专利]静脉注射用人乙型肝炎免疫球蛋白的制备方法

摘要

一种静脉注射用人乙型肝炎免疫球蛋白的制备方法，包括：通过低温乙醇分离方法，首先从免疫混合血浆中分离出FI+II+III沉淀，将FI+II+III沉淀放入注射用水中溶解进行二次分离，取上清液过滤，三次分离得FII沉淀；最后取一重量份FII沉淀放入5～6份注射用水中溶解，调节pH至4.00±0.05，用膜过滤，进行超滤脱醇、除菌过滤及病毒灭活，除菌分装。其采用低温乙醇法，应用低pH孵放病毒灭活和纳米膜病毒过滤双重病毒灭活/去除工艺，每一步骤都对目前血液中已知的可能病毒有减少、灭活或去除作用；与目前肌肉注射制品相比，制品的纯度、抗体效价，降低制品的多聚体的含量、蛋白质含量及抗补体活性等质量指标均有一定提高。

主权项

1、一种静脉注射用人乙型肝炎免疫球蛋白的制备方法，其特征是包括以下步骤：a、取合并后的免疫混合血浆，用生理盐水调节蛋白浓度至40～50g/L，用缓冲液调节悬液pH值至6.00±0.05，加-20℃以下95％乙醇使溶液的乙醇浓度为20％，并调节温度为-5±0.5℃，反应完全后，采用离心法分离获得FI+II+III沉淀；b、将FI+II+III沉淀放入0.8～0.9倍血浆量的0～2℃注射用水中完全溶解，用缓冲液调节溶液的pH值至5.35±0.05，用0～2℃注射用水调节溶液电导率至1.15±0.1ms/cm，用-20℃以下的95％乙醇调节溶液的乙醇浓度至14％，调节反应最终温度至-3.5±0.5℃，反应完全后，采用离心法分离，取上清液，加入上清液体积0.5％重量的硅藻土搅拌、过滤；c、在步骤b制得的过滤液中，加入过滤液体积5％的1mol/L NaCl溶液，加入过滤液体积1.5％±0.2％的1mol/L NaHCO3溶液，调节pH值至7.2±0.2，用-20℃以下的95％乙醇调节溶液乙醇浓度至25％，温度降至-9.0±1.0℃，反应完全后，采用离心法分离获得FII沉淀；d、以重量份计，将一份FII沉淀放入5～6份、2～8℃注射用水中溶解，用0.5mol/L盐酸调节溶液pH至4.00±0.05，用0.45μm膜过滤，进而进行超滤脱醇、除菌过滤及病毒灭活，除菌分装。