[发明专利]动物关节软骨组织总RNA提取方法无效
| 申请号： | 200710093163.9 | 申请日： | 2007-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN101182343A | 公开（公告）日： | 2008-05-21 |
| 发明（设计）人： | 初同伟;刘玉刚;周跃;欧娟娟 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学第二附属医院 |
| 主分类号： | C07H21/02 | 分类号： | C07H21/02;C07H1/06 |
| 代理公司： | 重庆志合专利事务所 | 代理人： | 胡荣珲 |
| 地址： | 40003*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种动物关节软骨组织总RNA提取方法，该方法有以下步骤：(1)取动物关节软骨组织，研磨，加入变性液，β－巯基乙醇，匀浆；(2)冰水浴下，加酸性水饱和酚，摇匀，加醋酸钠，氯仿、异戊醇混合液，冰水浴上15min；(3)4℃下，离心，取上清液，加氯仿、异戊醇混合液，离心取上清，加异丙醇，－20℃下沉淀，离心，得到凝胶状RNA和蛋白多糖混合沉淀，加无RNA酶水，溶解得胶状溶液；(4)取胶状溶液用plant RNAout试剂盒的RNA提取步骤得到总RNA沉淀，取沉淀，乙醇洗涤后用无RNA酶水溶解沉淀，即得关节软骨组织总RNA溶液。采用本发明方法提取的动物关节软骨组织总RNA的收率高，并且纯度高、质量、完整性好，可以满足分子生物学研究应用。 | ||
| 搜索关键词： | 动物 关节 软骨 组织 rna 提取 方法 | ||
【主权项】：
1.一种动物关节软骨组织总RNA提取方法，其特征在于该方法有以下步骤：(1)取动物关节软骨组织，立即投入液氮中研磨至粉末状，每50重量份的关节软骨组织加入1体积变性液，0.007体积的β-巯基乙醇，匀浆至无明显组织块；(2)将匀浆液置于冰水浴上，加酸性水饱和酚，摇匀，加醋酸钠，氯仿、异戊醇混合液，置于冰水浴上15min；(3)4℃下，离心，取上清液，加入氯仿、异戊醇混合液，离心取上清加入异丙醇，-20℃下沉淀30min，离心30分钟，得到凝胶状RNA和蛋白多糖混合沉淀，加入无RNA酶水，溶解沉淀得到胶状溶液；(4)取胶状溶液用plant RNAout试剂盒的RNA提取步骤得到总RNA沉淀，取沉淀，乙醇洗涤二次后用无RNA酶水溶解沉淀即得关节软骨组织总RNA溶液。
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