[发明专利]摩罗丹质量标准及其检测方法

摘要

本发明公开摩罗丹的质量控制方法。该方法包括麦冬、三七、地榆、当归、川芎、延胡索的薄层鉴别方法和白芍中芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)的含量测定，摩罗丹每1g含白芍以芍药苷C₂₃H₂₈O₁₁计，不得少于0.8mg。

主权项

1.摩罗丹的质量控制方法，其特征在于该方法包括如下鉴别和/或含量测定：鉴别包括如下方法中的一种或几种：A.取摩罗丹，置显微镜下观察：不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4～6μm；薄壁细胞类圆形，有椭圆形纹孔，集成纹孔群；非腺毛丁字形，头部细胞呈纤维状；纤维表面类圆形细胞中含细小圆形硅块，排列成行；无色不规则块状物易查见；木栓细胞深黄棕色，呈长方形或长多角形，有的胞腔内充满黄棕色内容物及油粒状物；石细胞黄棕色或无色，类长方形、类圆形或形状不规则，直径约至94μm；花粉粒黄棕色，呈类圆形，直径约至30μm，外壁有似网状雕纹；B.取摩罗丹9-18g，剪碎，加硅藻土6-12g，研匀，加水40-60ml，加盐酸4-6ml，超声处理或热回流或冷浸提取30分钟，滤过，滤液每次加溶剂乙醚、正丁醇或乙酸乙酯30-50ml，提取2-4次，合并溶剂乙醚、正丁醇或乙酸乙酯，蒸干，残渣加溶剂三氯甲烷、甲醇、乙醇或乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～12μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20-4∶5-1的三氯甲烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8-12％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；C.取摩罗丹9-18g，剪碎，加硅藻土6-12g，研匀，加三氯甲烷-甲醇-水为10-5∶5-2∶3-1的下层溶液50-70ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水饱和的正丁醇25ml使溶解，置分液漏斗中，用1％的氢氧化钠溶液洗涤2-4次，每次20-30ml，再用正丁醇饱和的水洗涤2-4次，每次20-30ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索乙素对照品、人参皂苷Rg1对照品加甲醇分别制成1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液，供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5-7∶1-3∶1-2∶1-2的乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品延胡索乙素色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，再喷以5％的硫酸香草醛-乙醇溶液为2∶8显色，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品人参皂苷Rg1色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；D.取第B项下残渣，残渣加溶剂三氯甲烷、甲醇、乙醇或乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取没食子酸对照品，加溶剂三氯甲烷、甲醇、乙醇或乙酸乙酯制成1ml含0.3-0.7mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6-30∶3-15∶1-5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％的三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；E.取摩罗丹5～10g，剪碎，加硅藻土1-5g，研匀，加溶剂甲醇、乙醇、石油醚、乙醚、三氯甲烷或乙酸乙酯50-70ml，超声处理15分钟，滤过，滤液挥干，残渣加溶剂甲醇、乙醇、石油醚、乙醚、三氯甲烷或乙酸乙酯0.4-0.6ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归、川芎对照药材各0.5g，加溶剂甲醇、乙醇、石油醚、乙醚、三氯甲烷或乙酸乙酯20ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9-45∶1-5的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；含量测定包括如下步骤：照高效液相色谱法测定：色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以15-60∶40-85的乙腈-水为流动相；检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于1000～5000；对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品适量，加溶剂甲醇、乙醇、正丁醇、水、三氯甲烷或乙酸乙酯制成每1ml含30-50μg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取摩罗丹小蜜丸或重量差异项下的大蜜丸，剪碎，精密称取1～10g，加入硅藻土1～10g，研匀，置具塞锥形瓶中，精密加入溶剂甲醇、乙醇、正丁醇、水、三氯甲烷或乙酸乙酯15-25ml，密塞，称重，超声处理或热回流或冷浸提取30分钟，取出放至室温后称重，用溶剂甲醇、乙醇、正丁醇、水、三氯甲烷或乙酸乙酯补足至15-25ml摇匀，滤过，精密吸取续滤液4-6ml，置10ml量瓶中，加溶剂甲醇、乙醇、正丁醇、水、三氯甲烷或乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；摩罗丹每1g含白芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于0.8mg。