[发明专利]一种重组腺相关病毒载体感染滴度的测定方法无效
申请号: | 200710149475.7 | 申请日: | 2007-09-13 |
公开(公告)号: | CN101386891A | 公开(公告)日: | 2009-03-18 |
发明(设计)人: | 曹晖;王宏伟;谭淑萍;蒋立新 | 申请(专利权)人: | 本元正阳基因技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100176北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提出了一种新的AAV2感染滴度检测方法,采用一株携带AAV2的rep-cap基因的重组HSV1病毒(HSV1-rc)作为辅助病毒,HSV1-rc和待测滴度的AAV2载体样品共同感染BHK-21细胞(也可以是其它HSV1敏感细胞,比如HEK-293、Hela、Vero、A549等),前者支持AAV2载体基因组在细胞中复制和产生子代AAV2载体,通过对AAV2载体基因组的梯度稀释和核酸探针杂交显色,得到载体的感染滴度。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 相关 病毒 载体 感染 测定 方法 | ||
【主权项】:
1. 一种重组腺相关病毒载体(rAAV)的感染滴度检测方法,其特征是:该方法的主要包括以下步骤:1)重组腺相关病毒载体(rAAV)样品经过梯度稀释,分别感染96孔板中的HSV1敏感细胞株BHK-21细胞,同时感染HSV1-rc/ΔUL2;2)48小时后裂解细胞,收集释放的DNA,将含DNA的裂解液转膜,经过DNA探针杂交,通过与AAV2载体标准品比较,得到待测AAV2样品的相对感染滴度。
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