[发明专利]载脂蛋白E4 ELISA试剂盒及其制备方法

摘要

本发明公开了载脂蛋白E4 ELISA试剂盒及其制备方法，应用纯化的人载脂蛋白E4制备抗人ApoE4抗体，亲和纯化后包被酶标板。试剂盒组成包括抗人ApoE4单克隆抗体包被的酶标板、酶标记抗体、ApoE4标准品冻干粉、样品稀释液、TMB底物显色液、浓缩洗涤液和终止反应液。固定在酶标板微孔表面上的抗体捕获标准液或样品液中的ApoE4，酶标记抗体识别ApoE4并与之结合，形成抗体－ApoE4－抗体－酶的复合物，酶与底物反应显色后测出吸光度，从标准曲线计算出样本中ApoE4浓度。该试剂盒检测人血清、血浆或脑脊液中载脂蛋白E4浓度，具有灵敏、快捷、简便、准确的优点，为体外诊断确定ApoE4基因型及基因剂量提供了有效的手段。

主权项

1.载脂蛋白E4 ELISA试剂盒，其特征在于该试剂盒的组成包括抗人ApoE4单克隆抗体包被的酶标板、酶标记抗体、ApoE4标准品冻干粉、样品稀释液、TMB底物显色液、浓缩洗涤液和终止反应液；其中：酶标记抗体：辣根过氧化物酶标记的抗人ApoE多克隆抗体；TMB底物显色液：2.08mmol/L3，3’，5，5’-四甲基联苯胺，12mmol/L过氧化氢，10mmol/L β-环糊精，0.1mol/L pH5.0的醋酸缓冲液；样品稀释液：10mmol/L pH7.4-7.6的磷酸盐缓冲液中含有1％BSA，0.05％Tween-20和1mg/L庆大霉素；浓缩洗涤液：0.1mol/L pH7.4-7.6的磷酸盐缓冲液中含有1％胎牛血清，0.5％Tween-20和20mg/L庆大霉素；终止反应液：1.0mol/L H2SO4。