[发明专利]一种用于Vero细胞的培养基及其培养方法

摘要

本发明涉及一种培养基的配制和使用方法，更具体地说涉及一种用于Vero细胞的培养基及其培养方法。属于生物制品领域。本发明产品的培养方法如下：将贴壁生长的Vero细胞，Vero细胞悬浮适应SFM无血清培养基驯化适应培养，Vero生长方式可由贴壁生长转化为悬浮生长；进一步使Vero细胞可以在Vero扩增CHEMICALLY DEFINED MEDIUM培养基中扩增生长。本发明方法具有良好的效果，因为使Vero细胞生长模式，从贴壁生长转化为悬浮生长，改变细胞的生长模式，可以极大地增加细胞产量。

主权项

1.一种Vero细胞悬浮适应SFM无血清培养基，其特征在于：培养基的组成成份及重量份为：成份 mg/L甘氨酸(Glycine) 10-50L-丙氨酸(L-Alanine) 5-30L-精氨酸(L-Arginine) 30-200L-门冬酰胺(L-Asparagine) 10-60L-天冬氨酸(L-Aspartic acid) 1-15L-半胱氨酸盐酸盐(L-Cysteine hydrochloride-H2O) 0.01-0.6L-胱胺酸二盐酸盐(L-Cystine 2HCl) 15-100L-谷氨酸(L-Glutamic Acid) 10-100L-谷氨酰胺(L-Glutamine) 50-200L-组氨酸(L-Histidine) 5-100L-羟脯氨酸(L-Hydroxyproline) 2-20L-异亮氨酸(L-Isoleucine) 10-100L-亮氨酸(L-Leucine) 10-100L-赖氨酸盐酸盐(L-Lysine hydrochloride) 15-120L-甲硫氨酸(L-Methionine) 2-30L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine) 5-50L-脯氨酸(L-Proline) 10-100L-丝氨酸(L-Serine) 5-60L-苏氨酸(L-Threonine) 5-50L-色氨酸(L-Tryptophan) 2-50酪氨酸盐钠盐二水(L-Tyrosine disodium salt dihydrate) 5-100L-缬氨酸(L-Valine) 5-100生物素(Biotin) 0.00001-0.5氯化胆碱(Choline chloride) 0.5-20.泛酸钙(D-Calcium pantothenated) 0.001-0.9叶酸(Folic Acid) 0.001-1.5肌醇(i-Inositol) 2.-30烟酰胺(Niacinamide) 0.0001-0.98氨基乙酸(Para-Aminobenzoic Acid) 0.05-3.盐酸吡哆醛(Pyridoxal hydrochloride) 0.002-0.7盐酸吡(Pyridoxine hydrochloride) 0.006-3.5核黄素(Riboflavin) 0.0001-6.盐酸硫胺(Thiamine hydrochloride) 0.003-0.15维生素B12(Vitamin B12) 0.002-1.8抗坏血酸(Ascorbic Acid) 0.01-1.2阿尔法-生育酚磷酸酯(Alpha-tocopherol Phosphate) 0.001-3(四水)硝酸钙(Calcium nitrate(Ca(NO3)24H2O) 50-200(无水)氯化镁(Magnesium Chloride(anhydrous)) 3-40(无水)硫酸镁 25-150(Magnesium Sulfate(MgSO4)(anhyd.))氯化钾(Potassium Chloride(KCl)) 150-600氯化钠(Sodium Chloride(NaCl)) 3000-10000一水磷酸氢二钠 5-200(Sodium Phosphate monobasic(NaH2PO4-H2O))五水硫酸铜(Cupric sulfate(CuSO4-5H2O)) 0.0001-0.03七水硫酸亚铁(Ferric sulfate(FeSO4-7H2O)) 0.002-0.8九水硝酸铁(Ferric Nitrate(Fe(NO3)3-9H2O)) 0.02-3.5七水硫酸锌(Zinc sulfate(ZnSO4-7H2O)) 0.003-0.86无水磷酸氢二钠 50-300(Sodium Phosphate dibasic(Na2HPO4)anhydrous)葡萄糖(D-Glucose(Dextrose)) 800-2000酚红(Phenol Red) 1-30丙酮酸钠(Sodium Pyruvate) 2-50黄嘌呤钠盐(Hypoxanthine Na) 0.008-8亚油酸(Linoleic Acid) 0.0003-1.2硫辛酸(Lipoic Acid) 0.003-0.8腐胺(Putrescine 2HCl) 0.0001-0.5谷胱甘肽(Glutathione(reduced)) 0.05-3胸苷(Thymidine) 0.02-6缓冲液(HEPES) 2000-6500白蛋白(Albumin) 300-800转铁蛋白(Holo Transferrin) 1-20胰岛素(Insulin) 1-20