[发明专利]一种生物催化合成阿魏酰低聚糖的方法

摘要

一种生物催化合成阿魏酰低聚糖的方法，属于阿魏酸衍生物合成技术领域。本发明以阿魏酸和麦麸中分离的低聚糖为原料，通过诺维信脂肪酶435的催化作用，合成阿魏酰低聚糖。由于分离的低聚糖的不同，可以得到不同的阿魏酰低聚糖，有利于对其进行理化性质及其他特性的分析，得到更好的利用。

主权项

1.一种生物催化合成阿魏酰低聚糖的方法，其特征是先将麦麸进行酶解处理，分离得到不同的低聚糖，即侧链连有阿拉伯糖的组成个数不同的低聚木糖，加入阿魏酸和脂肪酶，在叔丁醇中进行合成反应，对产物进行分离得到阿魏酰低聚糖；(1)低聚糖的制取：麦麸通过常规处理得到侧链连有阿拉伯糖的组成个数不同的低聚糖：木糖，木二糖，木三糖或木四糖；(2)催化合成：加入分离后的低聚糖和阿魏酸，两者的摩尔比为1∶1，介质为叔丁醇，添加阿魏酸重量10-12％的脂肪酶，温度控制在50-70℃，反应时间为10-14h；(3)混合物的分离：反应结束后，加入蒸馏水过滤回收脂肪酶，供重复使用；旋转蒸发回收得到叔丁醇，剩余液冷却至室温，过滤去除未反应的部分阿魏酸和低聚糖；滤液为粗产物；(4)产物的分离：滤液粗产物过0.45μm的微孔滤膜，滤液浓缩，浓缩液上Amberlite XAD-2柱，柱预先用体积分数95％乙醇洗涤，再用蒸馏水平衡，依次用2倍柱体积的蒸馏水、3倍柱体积的体积分数50％甲醇水溶液和2倍柱体积的体积分数100％甲醇进行洗脱，将体积分数50％甲醇水溶液洗脱组分浓缩，并进行冷冻干燥，再将固形物配成50mg/mL的水溶液，用SephadexLH20作进一步分离，Sephadex LH20柱预先用体积分数25％乙醇平衡，并用体积分数25％乙醇做洗脱液，上样量10mL，洗脱液流速0.5mL/min，每管收集8mL。