[发明专利]利用降低亲和力酶互补报告分子系统检测分子间相互作用有效

专利信息
申请号: 200780017417.7 申请日: 2007-03-12
公开(公告)号: CN101443460A 公开(公告)日: 2009-05-27
发明(设计)人: T·维尔曼;H·M·布劳 申请(专利权)人: 利兰·斯坦福青年大学托管委员会
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N5/16;C12N1/21;C12N1/15;C12N5/14;C12N1/19;C12N15/11
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 代理人: 郭文洁;黄可峻
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 发明提供了用于检测分子间相互作用的方法和组合物。本发明的方面包括使用降低亲和力酶互补报告分子系统。还提供的是用于实施所述方法的实施方式的系统和试剂盒。
搜索关键词: 利用 降低 亲和力 互补 报告 分子 系统 检测 相互作用
【主权项】:
1. 一种测定第一和第二蛋白质是否相互作用的方法,所述方法包括:(a)提供细胞,其包含:(i)所述第一蛋白质和第一β-半乳糖苷酶片段的第一融合蛋白,其中所述第一β-半乳糖苷酶片段是变异的最小N-末端β-半乳糖苷酶肽;和(ii)所述第二蛋白质和第二β-半乳糖苷酶片段的第二融合蛋白;其中所述第一和第二β-半乳糖苷酶片段之间具有亲和力,其在不存在所述第一和第二蛋白质之间的相互作用的情况下提供已知水平的β-半乳糖苷酶活性,所述活性低于在存在所述第一和第二蛋白质之间的相互作用的情况下所观察到的活性;和(b)评估所述细胞的β-半乳糖苷酶活性来确定所述第一和第二蛋白质是否相互作用。
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