[发明专利]制备胰岛素样生长因子-1与聚(乙二醇)的偶联物的方法有效
| 申请号： | 200780031987.1 | 申请日： | 2007-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN101511390A | 公开（公告）日： | 2009-08-19 |
| 发明（设计）人： | S·费舍尔;F·赫西;H·克内根;K·朗;F·梅茨格;J·T·雷古拉;C·尚茨;A·肖布马尔;H·J·舍恩菲尔德 | 申请（专利权）人： | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 |
| 主分类号： | A61K47/48 | 分类号： | A61K47/48;C12N15/12;C07K14/65;C12N9/52;C12N15/62 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所 | 代理人： | 黄革生;凌 立 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 瑞士;CH |
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| 摘要： | 制备赖氨酸聚(乙二醇)化IGF-I或IGF-I变体的方法，所述变体包含的选自第27位、第65位和/或第68位赖氨酸的一个或两个氨基酸独立地被另一个极性氨基酸取代，其特征在于培养包含表达载体的原核宿主细胞，所述表达载体含有编码融合蛋白的核酸，所述融合蛋白包含的所述IGF-I或IGF-I变体的N末端与前肽的C末端连接，所述前肽C末端以氨基酸-Y-Pro终止，其中Y选自Pro、Pro-Ala、Pro-Gly、Pro-Thr、Ala-Pro、Gly-Pro、Thr-Pro、Arg-Pro或Pro-Arg-Pro；回收并聚(乙二醇)化所述融合蛋白；用IgA蛋白酶切割所述聚(乙二醇)化的融合蛋白；并回收所述聚(乙二醇)化的IGF-I或IGF-I变体。所述IGF-I或IGF-I变体用于治疗神经变性疾病，如阿尔茨默氏病。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 胰岛素 生长因子 乙二醇 偶联物 方法 | ||
【主权项】：
1. 制备赖氨酸聚(乙二醇)化IGF-I或IGF-I变体的方法，所述变体包含的选自第27位、第65位和/或第68位赖氨酸的一个或两个氨基酸独立地被另一个极性氨基酸取代，其特征在于：a)培养包含表达载体的原核宿主细胞，所述表达载体含有编码融合蛋白的核酸，所述融合蛋白包含的所述IGF-I或IGF-I变体的N末端与前肽的C末端连接，b)所述前肽C末端以氨基酸-Y-Pro终止，其中Y选自Pro、Pro-Ala、Pro-Gly、Pro-Thr、Ala-Pro、Gly-Pro、Thr-Pro、Arg-Pro或Pro-Arg-Pro，c)回收并聚(乙二醇)化所述融合蛋白，d)用IgA蛋白酶切割所述聚(乙二醇)化的融合蛋白，并e)回收所述聚(乙二醇)化的IGF-I或IGF-I变体。
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