[发明专利]特异性活化人T2R受体的苦味配体的鉴别和用于鉴别人苦味调节剂的相关测定

摘要

本发明涉及T2R味觉受体家族中特定的人味觉受体响应特定的苦味化合物的发现。本发明还涉及特定的hT2R9等位基因和它们在用相同苦味配体的功能测定中完全不同的活性的发现。本发明进一步涉及这些T2R受体在用于鉴别配体的测定中的用途，所述配体通过特定的苦味配体和相关的化合物调节这些味觉受体的活化。这些化合物可用作添加剂和/或从食品、饮料、化妆品和药物中除去以改良(阻断)T2R相关的苦味。T2R配体还可用作治疗和调节T2R相关的胃肠和代谢功能以及治疗胃肠和代谢疾病的治疗剂，所述疾病如进食障碍、食物感受、食物吸收、肥胖、糖尿病、克罗恩病、乳糜泻等。

主权项

1.一种用于鉴别调节选自hT2R1、hT2R3、hT2R4、hT2R5、hT2R7、hT2R8、hT2R9、hT2R10、hT2R13、hT2R14、hT2R16、hT2R44、hT2R44、hT2R50、hT2R54、hT2R55、hT2R61、hT2R64、hT2R65、hT2R67、hT2R71、hT2R75和hT2R76的人T2R苦味受体的化合物的测定，其中所述苦味受体特异性响应选自乙酰舒泛K、对乙酰氨基酚、2-乙酰吡嗪、芦荟素、氨基-2-降莰烷-羧酸、苦杏仁苷、穿心莲内酯、熊果苷、马兜铃酸、阿托品、番木鳖碱、4-苄基哌啶、咖啡因、氯霉素、氯喹、辛可宁、环丙沙星、克拉霉素、克林霉素、环己酰亚胺、环辛酮、苯甲酸地那铵、地塞米松、盐酸地尔硫卓、二异丁胺、二甲双胍、2，6-二甲基哌啶、多塞平、马来酸依那普利、腾喜龙、依诺沙星、(-)-表儿茶素、(-)-红霉素、乙基吡嗪、法莫替丁、加巴喷丁、银杏苦内酯A、甲状腺肿素、愈创木酚甘油醚、盐酸拉贝洛尔、亚麻苦苷、洛美沙星、(-)-羽扇豆宁、N-甲基硫脲、1-甲基-2-喹啉酮、甲基强的松龙、硝基萘、硝基糖精、氧氟沙星、橄榄苦苷、奥美拉唑、氯化羟丁宁、奥芬溴铵、肽-LPFNQL、肽-LPFSQL、肽-YQEPVLGPVRGPFPIIV、肽-PVLGPVRGPFPIIV、肽-PVRGPFPIIV、肽-RGPFPIIV、N-乙基-N′-苯脲、2-甲基吡啶、苦味酸、二盐酸哌仑西平、苯硫脲、强的松、普鲁卡因胺、6-正丙基-2-硫尿嘧啶、苦木素、奎纳克林、奎宁、雷尼替丁、糖精、D-(-)-水杨苷、五水合硫酸司巴丁、八乙酸蔗糖酯、马钱子碱、磺胺甲噁唑、可可碱、N-硫代乙酰苯胺、对称二苯硫脲、苯甲唑啉、甲苯基脲、曲匹地尔、三甲氧苄二氨嘧啶和L-色氨酸的至少一种苦味配体或结构上相关的化合物，所述测定包括：i.就其对至少一种所述苦味化合物诱导hT2R1、hT2R4、hT2R5、hT2R7、hT2R8、hT2R9、hT2R10、hT2R13、hT2R14、hT2R16、hT2R44、hT2R50、hT2R51、hT2R54、hT2R55、hT2R61、hT2R64、hT2R65、hT2R67、hT2R71、hT2R75和hT2R76多肽中的至少一种的活化的效应筛选化合物，其中所述hT2R多肽分别地(1)具有包含在SEQ ID NO：4、6、8、10、12、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46和48中的多肽序列，和/或(2)由包含在SEQ ID NO：3、5、7、9、11、13、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45和47中的核酸序列分别地编码，和/或(3)由在严格杂交条件下与(2)中的序列杂交的核酸序列编码，和/或(4)具有与(1)中的序列具有至少90％序列同一性的多肽序列，或被至少一种所述苦味配体或结构上相关的化合物活化的(1)、(2)、(3)或(4)中任何一种的片段或嵌合体，和ii.根据所述化合物对所述受体被至少一种所述苦味化合物或结构上相关的化合物活化的效应，确定所述化合物是否调节苦味；和iii.如果所述化合物调节所述人苦味受体被至少一种所述苦味化合物的活化，则鉴别其为潜在的苦味调节剂。