[发明专利]内化

摘要

通过以下方式能够有效地鉴定内化到细胞内的靶标(和与其特异性结合的结合部分)：将编码所述结合部分的遗传物质与编码结合到未内化的靶标的结合部分的遗传物质分离(或基本分离)。这能够通过采用结合部分的展示文库来实现，所述结合部分经由非融合蛋白的形式而具有基因型/表型关联，从而能够在不裂解所述细胞的情况下将编码未内化的靶标的遗传物质分离(或基本分离)。随后能够将内化的遗传物质分离并扩增。

主权项

1.一种回收内化到细胞中的复合体的编码结合部分的核酸分子的方法，所述方法包括如下步骤：(a)使细胞与噬菌体颗粒的多样性集合接触，其中，每个或基本上所有的所述噬菌体颗粒均在其表面上展示结合部分，其中所述结合部分被展示为具有所述噬菌体颗粒的噬菌体衣壳蛋白的非融合的(多)肽并且其中每个或基本上所有的所述噬菌体颗粒均包含编码所展示的结合部分的核酸分子，(b)使所述噬菌体颗粒上展示的所述结合部分与其靶标结合，从而使得形成至少一种复合体，所述复合体中每一种均包含带有其所展示的结合部分的噬菌体颗粒和其靶标，(c)在能够使至少一种所述复合体内化到细胞中的条件下培养所述细胞，(d)在基本上不发生细胞裂解的条件下洗脱未内化的所述编码结合部分的核酸分子，(e)使包含内化复合体的所述细胞裂解，和(f)从裂解的细胞中回收源自至少一种的内化复合体的所述编码结合部分的核酸分子。