[发明专利]一种高产葡萄糖酸钠菌株的培育方法

摘要

本发明公开一种高产葡萄糖酸钠菌株的培育方法，以葡萄糖酸钠生产中分离得来的菌株为出发菌株，经活化培养基培养后，取其生长正常、菌丝健壮、孢子丰满的斜面作为分离纯化的对象，经保温处理后进行平板涂布，经恒温培养和紫外线照射后以牛皮纸包扎再进行恒温培养，选取变色透明圈较大的菌落培养成成熟饱满的斜面孢子，经摇床筛选出高转化率的葡萄糖酸钠菌株。本发明所述的菌株在高峰期降糖速率达到2.5％/h，发酵罐生产中转化率达到117％以上，发酵周期14h以内，提取率95％以上，提高了初糖浓度，缩短了发酵周期，降低了残糖，降低了生产成本。

主权项

1、一种高产葡萄糖酸钠菌株的培育方法，其特征在于以葡萄糖酸钠生产中来自于发酵转化率为100-120％的大罐中分离得来的菌株为出发菌株，经活化培养基培养后，取其生长正常、菌丝健壮、孢子丰满的斜面作为分离纯化的对象，经10-109倍数的稀释梯度，分别在60℃、70℃和80℃的温度下保温处理5分钟，然后进行菌种平板涂布，于40℃、40％的相对湿度下恒温培养6-10h，待孢子萌芽时经40W紫外灯30cm距离垂直照射1-3分钟，迅速以黑色牛皮纸包扎单板移入恒温培养箱于40℃、40％的相对湿度下恒温培养3-4天，待长出的菌落中心有黑色孢子长出时，选取变色透明圈较大的菌落，将其孢子挑到专用孢子生长培养基斜面上，在35-40℃、相对湿度40％的条件下，避光恒温培养5-6天，得到成熟饱满的斜面孢子；将上述培养好的斜面孢子，选取生长旺盛、饱满的斜面进行摇床筛选：在温度40℃，转速200r/min，湿度70-80％的相同条件下，进行初次筛选、复筛选、二次复筛选、三次复筛选，每次筛选分别淘汰50％-60％，最终选出高转化率的葡萄糖酸钠菌株。