[发明专利]一种体内诱导出针对TNF－α分子的自身抗体的蛋白疫苗的构建方法无效
| 申请号： | 200810017235.6 | 申请日： | 2008-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN101214372A | 公开（公告）日： | 2008-07-09 |
| 发明（设计）人： | 张英起;万一;韩苇;包春杰;薛晓畅;李萌;秦鑫 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第四军医大学 |
| 主分类号： | A61K38/19 | 分类号： | A61K38/19;C07K16/24;C12N15/62;C12N15/70;C07K19/00;A61P37/02;A61P35/00;A61P29/00;A61P31/12 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 | 代理人： | 李郑建 |
| 地址： | 710032*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种体内诱导出针对TNF－α分子的自身抗体的蛋白疫苗的构建方法，方法采用人工合成mTNF－TT830－844，mTNF－HEL46－61，mTNF－PADRE基因片段，将该片段插入pBV220载体中构建mTNF－TT830－844，mTNF－HEL46－61，mTNF－PADRE蛋白基因；含有目的基因mTNF－TT830－844，mTNF－HEL46－61，mTNF－PADRE的原核表达载体的构建及重组蛋白表达，经表达产物的鉴定、重组蛋白的纯化，将mTNF－TT830－844、mTNF－HEL46－61、mTNF－PADRE蛋白免疫小鼠后产生的抗血清与小鼠TNF－α的结合作用，该抗血清在体外可以中和小鼠TNF－α对L929细胞的杀伤；比较这三种分子诱导针对mTNF－α自身抗体的滴度，筛选出mTNF－PADRE蛋白；将筛选的mTNF－PADRE蛋白，通过免疫小鼠可突破小鼠的免疫限制，产生高滴度抗小鼠TNF－α自身抗体，其对应的重组人TNF－PADRE融合蛋白能在人体内产生抗人TNF－α自身抗体，即可得到TNF－α分子的自身抗体的蛋白疫苗。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 体内 诱导 针对 tnf 分子 自身抗体 蛋白 疫苗 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种体内诱导出针对TNF-α分子的自身抗体的蛋白疫苗的构建方法，其特征在于，该方法采用人工合成mTNF-TT830-844，mTNF-HEL46-61，mTNF-PADRE基因片段，将该片段插入pBV220载体中构建mTNF-TT830-844，mTNF-HEL46-61，mTNF-PADRE蛋白基因；含有目的基因mTNF-TT830-844，mTNF-HEL46-61，mTNF-PADRE的原核表达载体的构建及重组蛋白表达，经表达产物的鉴定、重组蛋白的纯化，将mTNF-TT830-844、mTNF-HEL46-61、mTNF-PADRE蛋白免疫小鼠后产生的抗血清与小鼠TNF-α的结合作用，该抗血清在体外可以中和小鼠TNF-α对L929细胞的杀伤；比较这三种分子诱导针对mTNF-α自身抗体的滴度，筛选出mTNF-PADRE蛋白；将筛选的mTNF-PADRE蛋白，通过免疫小鼠可突破小鼠的免疫限制，产生高滴度抗小鼠TNF-α自身抗体，其对应的重组人TNF-PADRE融合蛋白能在人体内产生抗人TNF-α自身抗体，即可得到TNF-α分子的自身抗体的蛋白疫苗。
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