[发明专利]赤松(Pinus densiflora)组织培养增殖方法

摘要

一种赤松组织培养增殖方法，该方法以赤松无菌幼苗子叶节(含子叶及刚萌动的上胚轴和6～8mm下胚轴)为外植体，接种于GD+6-BA3.0～5.0mg/L+NAA0.1～0.3mg/L培养基中诱导子叶基部产生丛生芽；4～5周后将外植体连同已分化的丛生芽转入添加活性炭或NAA的培养基中促进芽的伸长；待丛生芽长达1.5～2.0cm时将其分别单个切下，并切割成5～8mm小段，接种于GD+6-BA1.5～2.5mg/L+NAA0.25mg/L培养基中进一步诱导丛生芽增殖。增殖的丛生芽经过培养伸长后可再用于新一轮增殖。采用本发明，丛生芽增殖系数达3.5～4.6，一粒种子2年后可增殖出2～3万株可用于生根的组培苗。

主权项

1、一种赤松组织培养增殖方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)将赤松无菌萌发3～4周的幼苗子叶节(含子叶及刚萌动的上胚轴和6～8mm下胚轴)接种于含有6-苄基嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)的基本培养基GD上，诱导子叶基部产生丛生芽；(2)将外植体连同已分化的丛生芽转入含有活性炭(AC)或NAA的基本培养基DCR中，促进丛生芽伸长；(3)选取生长健壮、长1.5～2.0cm的丛生芽单个切割下来，切去茎尖生长点并将其切割成5～8mm小段，接种至含有6-BA和NAA的基本培养基GD中，诱导丛生芽增殖。步骤(3)增殖产生的丛生芽再转入步骤(2)所述的培养基中促进其伸长，然后再重复步骤(3)，循环往复，可获得大量丛生芽，从而实现丛生芽的大量增殖。步骤(2)、步骤(3)的继代周期分别为4～5周。