[发明专利]人肿瘤特异性Ki67基因启动子

摘要

本发明公开了人肿瘤细胞增殖抗原Ki67蛋白编码基因的启动子，具体包括该启动子的克隆、序列、功能及其用途。本发明公布了位于Ki67基因5′侧翼－820～+771位置，包含Ki67基因启动子的1591bp的序列。使用缺失分析法分别从Ki67基因5′侧翼的5′端和3′端逐段缺失，得到不同长度的DNA截短片段，这些片段被插入萤火虫荧光素酶报告基因上游，构建一系列表达质粒。将这些质粒转染四种肿瘤细胞和正常细胞瞬时表达，确定了Ki67基因核心启动子位于Ki67基因－223～+30。Ki67基因核心启动子在肿瘤细胞内具有高转录活性和肿瘤特异性，是非常有用的肿瘤特异性启动子。该启动子可用于调控治疗基因表达，或用于构建条件增殖病毒，从而实现选择性杀伤肿瘤细胞，广泛用于肿瘤靶向治疗。

主权项

1.一种人肿瘤特异性Ki67基因启动子，其核苷酸序列选自下组：(1)SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，或(2)SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列的互补序列，或(3)SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列中任一部分，或发生一处或多处缺失突变或替换突变，并具有与所述的碱基序列相似的启动子功能的等价物，即相似的肿瘤特异性和相似程度的启动子活性；其核心启动子存在于SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列中。