[发明专利]结合藻红胆素的藻红蓝蛋白类荧光蛋白质的制备方法有效
| 申请号： | 200810025758.5 | 申请日： | 2008-01-11 |
| 公开（公告）号： | CN101481701A | 公开（公告）日： | 2009-07-15 |
| 发明（设计）人： | 夏坤;佟顺刚 | 申请（专利权）人： | 广州天宝颂原生物科技开发有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/60 | 分类号： | C12N15/60;C12N15/31;C12N15/52;C12N15/70;C07K14/405 |
| 代理公司： | 广州市南锋专利事务所有限公司 | 代理人： | 刘 媖 |
| 地址： | 510663广东省广州市科学*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种结合藻红胆素(PEB)的藻红蓝蛋白类荧光蛋白质的制备方法，是通过应用藻胆蛋白beta155裂合酶催化藻红胆素与藻红蓝蛋白类脱辅基蛋白共价结合，制备结合PEB的藻红蓝蛋白类荧光蛋白质。本发明的方法应用生物过程生产藻红蓝蛋白类荧光蛋白质，是一种环境友好的生产方法。藻红蓝蛋白类荧光蛋白质能应用于食品、保健与医药功能材料领域，特别是应用为生物和医学分子监测领域的荧光探针。 | ||
| 搜索关键词： | 结合 藻红胆素 藻红蓝 蛋白 荧光 蛋白质 制备 方法 | ||
【主权项】：
1. 一种结合藻红胆素的藻红蓝蛋白类荧光蛋白质的制备方法，其特征在于包括下述步骤：(1)用基因工程方法，将beta155裂合酶基因或其同源基因克隆于表达载体中，得到beta155裂合酶表达质粒；(2)用基因工程方法，将藻红蓝蛋白类脱辅基蛋白基因或其同源基因克隆于第二个表达载体中，得到脱辅基蛋白表达质粒；(3)用基因工程方法，将藻红胆素生物合成酶基因hol和pebB或其同源基因克隆于第三个表达载体中，得到hol和pebB表达质粒；(4)用基因工程方法，将藻红胆素生物合成酶基因pebA或其同源基因克隆于第四个表达载体中，得到pebA表达质粒；(5)将beta155裂合酶表达质粒、脱辅基蛋白表达质粒、hol和pebB表达质粒和pebA表达质粒依次转入配套的宿主菌，当这些表达质粒都转入宿主菌后，得到相应的工程菌，应用此工程菌通过发酵工程生产结合PEB的藻红蓝蛋白类荧光蛋白质；发酵后，按常规蛋白质提纯技术，提纯得到相应的结合PEB的藻红蓝蛋白类荧光蛋白质。
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