[发明专利]凝血酶-壳聚糖自组装纳米微粒的制备方法及用途

摘要

本发明涉及凝血酶-壳聚糖自组装纳米微粒制备方法及用途。本发明将壳聚糖加入乙酸水溶液形成壳聚糖溶液；将凝血酶加入到缓冲液形成凝血酶溶液；将凝血酶溶液与壳聚糖溶液混合均匀，加入交联剂搅拌后，将其倒入液体石蜡中搅拌，再加入分散剂，乳化；再加入交联剂通过水浴进行交联反应后，过滤，用丙酮洗涤后，再用乙醇洗涤脱水，最后真空干燥，获得凝血酶-壳聚糖自组装纳米微粒。本发明将凝血酶与壳聚糖按比例投料首次制备得到自组装成纳米微粒的凝血酶-壳聚糖，保持其凝血酶的稳定性和更好地发挥其壳聚糖与凝血酶的综合止血效果。本发明可广泛应用于外科领域如普外科、骨科、心胸外科、神经外科、妇产科等的组织止血、组织封口和组织粘合。

主权项

1. 一种凝血酶-壳聚糖自组装纳米微粒的制备方法，其特征在于包括以下顺序步骤：(1)将壳聚糖加入到乙酸水溶液中，搅拌至完全溶解，形成壳聚糖乙酸水溶液；(2)将凝血酶加入至pH6.0-8.0缓冲液中，搅拌溶解，形成凝血酶溶液；(3)将凝血酶缓冲溶液加入到壳聚糖乙酸水溶液中，再加入交联剂至浓度为0.01％-0.10％，升温至30℃-50℃，以100转/分钟-800转/分钟的速度搅拌20分钟-60分钟，将其倾倒入至液体石蜡中，搅拌，再加入分散剂至浓度为1％-10％，以300转/分钟-1500转/分钟的速度高速搅拌2小时-8小时进行乳化；(4)取上述乳化液再加入交联剂至浓度为0.5％-5.0％，搅拌20分钟-60分钟，使其分散均匀，置于30℃-50℃水浴中进行交联，8小时-12小时，将产物冷却至室温，取出，进行过滤；(5)产物用丙酮洗涤2-5次，使得丙酮表面无漂浮油斑，即得凝胶状半透明纳米微粒；再以乙醇洗涤脱水，即得固态纳米微球；(6)将制备产品置于真空干燥器中10℃-40℃温度下真空干燥，得凝血酶—壳聚糖类白色或白色自组装纳米微粒。