[发明专利]一种超氧化物歧化酶基因的食品级表达方法及其专用载体无效
| 申请号： | 200810025998.5 | 申请日： | 2008-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN101255436A | 公开（公告）日： | 2008-09-03 |
| 发明（设计）人： | 朱倩婷;赵士炜;黄晓峰;张文庆 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N15/81;C12N9/08 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 | 代理人： | 裘晖 |
| 地址： | 510275广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种超氧化物歧化酶基因食品级表达方法及其专用载体。该方法是构建含有超氧化物歧化酶基因的酿酒酵母食品级表达载体，将构建的酿酒酵母食品级表达载体导入酿酒酵母中，获得重组酿酒酵母，诱导重组酿酒酵母使超氧化物歧化酶基因得到表达。本发明能直接表达出食品级的超氧化物歧化酶产物，弥补了传统SOD制备方法以及毕赤酵母和原核表达系统表达方式的表达产物需经复杂步骤纯化后才能用于食品生产中的不足；本发明还具有原料生物体生长周期短，生产规模大，提取成本低的优点，具有重要的工业应用前景和实际意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 超氧化物歧化酶 基因 食品级 表达 方法 及其 专用 载体 | ||
【主权项】：
1、一种超氧化物歧化酶基因的食品级表达方法，其特征在于包括如下步骤：首先，超氧化物歧化酶基因插入酿酒酵母表达载体的多克隆位点处后，构建含有超氧化物歧化酶基因的酿酒酵母表达载体，通过限制性内切酶Nco I和ApaL I双酶切该表达载体，完全去除AmpicillinR抗生素筛选标志，同时切去了URA3基因片段的部分片段；然后，将被酶切去除的URA3片段重新与含有超氧化物歧化酶基因的酿酒酵母表达载体连接，得到含有超氧化物歧化酶基因、GAL1启动子和终止子序列、多克隆位点、URA3片段以及不含有AmpicillinR抗生素筛选标志的食品级酿酒酵母表达载体即食品级表达超氧化物歧化酶基因的专用载体；将改造好的酿酒酵母食品级表达载体导入酿酒酵母中，筛选获得重组酿酒酵母，诱导重组酿酒酵母使超氧化物歧化酶基因得到表达。
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