[发明专利]一种γ-聚谷氨酸的制备方法

摘要

本发明提供一种γ-聚谷氨酸的制备方法，该方法用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)PGA-7 CCTCC M 206102做发酵菌株对发酵培养基进行摇瓶发酵以制备γ-聚谷氨酸，其工艺过程包括斜面菌种活化、菌种的液体活化、摇瓶发酵和摇瓶发酵醪液提取。本发明采用由多种有机氮源和无机氮源相组合的优选的发酵原料，在最佳摇瓶发酵工艺条件下，产γ-PGA最高可达27.3g/l，具有良好的工业化应用前景。

主权项

1.一种γ-聚谷氨酸的制备方法，用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)PGA-7CCTCC M206102做发酵菌株进行摇瓶发酵，其工艺过程如下：(1)斜面菌种活化：将培养好的保藏斜面种(Bacillus subtilis PGA-7CCTCC M206102)划线于新配制的LB斜面上，LB斜面培养基组成如下：蛋白胨8～12g，酵母膏3～8g，NaCl9～11g，琼脂15～20g，自来水溶解后定容至1L，调pH值至6.8～7.2，33～38℃培养12～24小时，再冷藏于4℃1～5天；(2)菌种的液体活化：将上述活化斜面上约1cm2面积的菌种刮下，接种于液体活化培养基中，液体活化培养基组成如下：柠檬酸15～20g，NH4Cl或(NH4)2SO46～10g，蛋白胨5～7g，酵母粉15～20g，玉米浆10～15g，NaCl 3～5g，自来水溶解后定容至1L，调pH值至6.0～7.0，液体活化培养基装于250ml三角瓶中，三角瓶装量为25ml，于32～37℃往复式摇床振荡培养18～24小时，摇床转速为80～110r/m，冲程为65～75mm；(3)摇瓶发酵：按5％接种量，取2ml培养好的液体活化种，接入发酵培养基中，发酵培养基成份如下：葡萄糖或甘油或柠檬酸30～40g，果糖0～4g，NH4Cl 12～20g，蛋白胨10～14g，酵母粉30～45g，玉米浆20～30g，NaCl 5～8g，自来水溶解后定容至1L，所述的发酵培养基于灭菌前调pH值至6.2～6.5，用500ml三角瓶装，装量40ml；于32～37℃，冲程65～80mm，转速90～130r/m的往复式摇床振荡培养60～84小时，停止发酵；(4)发酵完毕的摇瓶发酵醪液经提取工艺即得含γ-聚谷氨酸的制品。