[发明专利]从造礁石珊瑚中提取虫黄藻基因组DNA的试剂盒及其方法有效

专利信息
申请号: 200810027305.6 申请日: 2008-04-09
公开(公告)号: CN101250521A 公开(公告)日: 2008-08-27
发明(设计)人: 黄晖;董志军;黄良民;李元超 申请(专利权)人: 中国科学院南海海洋研究所
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 广州科粤专利代理有限责任公司 代理人: 余炳和
地址: 510301广*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明提供一种从造礁石珊瑚中提取虫黄藻基因组DNA的试剂盒及其方法。试剂盒包括:试剂A(裂解液)、试剂B(蛋白酶E)、试剂C(RNAase A)、试剂D(过饱和NaCl溶液)、试剂E(DNA洗涤液)、试剂F(DNA洗脱液)。在本发明的方法中,首先用含SDS的裂解液裂解组织细胞,然后提供一个高盐低PH的环境,使溶液中蛋白质进一步变性,而DNA可以结合在硅胶柱上。最后在水溶性缓冲液中,DNA就能从层析柱上定量回收。采用本试剂盒及其提取方法,可以快速便捷从不同种类的造礁石珊瑚中提取虫黄藻的基因组DNA,所获得的DNA可以用于分子生态学、系统进化等研究,进而满足珊瑚礁自然保护区定期监测任务的需要。
搜索关键词: 礁石 珊瑚 提取 虫黄藻 基因组 dna 试剂盒 及其 方法
【主权项】:
1.从造礁石珊瑚中提取虫黄藻基因组DNA的试剂盒,包含有以下试剂:(a)试剂A:由pH8.0,100-300mM的Tris-Boric溶液、10-100mM的EDTA溶液、质量浓度1-5%的SDS溶液、50-200mM的NaCl溶液和蒸馏水按25∶10∶10∶2∶53的体积比混合而成;(b)试剂B:为蛋白酶E,其浓度为5-15mg/ml;(c)试剂C:为RNAase A,其浓度为5-30mg/ml;(d)试剂D:为过饱和NaCl溶液,含有5-7M的NaCl;(e)试剂E:为DNA洗涤液,为体积浓度为60-80%的乙醇溶液;(f)试剂F:为DNA洗脱液,采用pH8.0,5-20mM的TE缓冲液。
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