[发明专利]变异鳞毛蕨的孢子繁殖方法

摘要

本发明涉及一种能快速繁殖变异鳞毛蕨(Dryopteris varia(L.)Ktunze)的孢子繁殖方法，其特征是将消毒过的变异鳞毛蕨孢子在孢子萌发培养基中培养至发育成片状原叶体，然后将原叶体依次在增殖培养基培养约30天，孢子体诱导培养基中培养约40天，孢子体继代培养基中培养约20天，待形成幼孢子体，长出2～3片幼孢子叶后转入孢子体生根培养基中培养约30天，待基部长出褐色带鳞片的细根就出瓶移植，炼苗后移栽至土壤基质培养。本发明投入少，设备简单，从孢子萌发到幼孢子体形成仅需110d左右，短的时间内获得大量变异鳞毛蕨种苗，幼孢子苗成活率可达90％，使变异鳞毛蕨能成为优良的观叶植物并发挥其药用价值。

主权项

1.一种变异鳞毛蕨的孢子繁殖方法，其特征包括以下的步骤：(1)收集变异鳞毛蕨(Dryopteris varia(L.)Ktunze)孢子，先在酒精中浸泡25～30s，然后再在升汞溶液中浸泡7～8min，消毒后用无菌水漂洗；(2)将上述消毒过的变异鳞毛蕨孢子用无菌水配成悬浮液，加入孢子萌发培养基中，在温度23～25℃，光照强度2000～2500lx，光照时间11～13h/d条件下培养，先萌发出绿色丝状体，再发育成片状原叶体，所述的孢子萌发培养基是每升含6～8g琼脂，18～22g蔗糖，其余为MS或1/2MS，pH 5.7～5.8的培养基；(3)将上述片状原叶体转接到增殖培养基中，在温度23～25℃，光照强度2000～2500lx，光照时间11～13h/d条件下，培养25～35d后，转入孢子体诱导培养基中，在温度23～25℃，光照强度2000～2500lx，光照时间11～13h/d条件下，培养至原叶体出芽后转入孢子体继代培养基，在温度23～25℃，光照强度2000～2500lx，光照时间11～13h/d条件下，培养至形成幼孢子体，长出2～3片幼孢子叶；所述的增殖培养基每升中含有6-苄基嘌呤0.15～0.25mg，萘乙酸0.15～0.25mg，琼脂6～8g，蔗糖28～32g，其余为MS，pH 5.7～5.8；所述的孢子体诱导培养基每升中含有激动素6-糠基氨基嘌呤或N6-呋喃甲基腺嘌呤0.4～0.6mg，萘乙酸0.15～0.25mg，琼脂6～8g，蔗糖28～32g，其余为MS，pH 5.7～5.8；所述的孢子体继代培养基每升中含有萘乙酸0.05～0.15mg，琼脂6～8g，蔗糖28～32g，其余为MS，pH 5.7～5.8；(4)将上述幼孢子体分株转接到孢子体生根培养基上，在温度23～25℃，光照强度2000～2500lx，光照时间11～13h/d条件下，培养至幼孢子体基部长出褐色带鳞片的细根时，可出瓶移栽，炼苗后移栽至pH值为6.3～6.4的土壤基质培养，所述的孢子体生根培养基每升中含有萘乙酸0.25～0.35mg，活性碳4～6g，琼脂6～8g，蔗糖28～32g，其余为1/2MS培养基，pH 5.7～5.8。