[发明专利]从嗜酸喜温硫杆菌中快速选育具有高效浸出铁闪锌矿菌株的方法

摘要

从嗜酸喜温硫杆菌中快速选育具有高效浸出铁闪锌矿菌株的方法，本发明通过利用铁闪锌矿细菌浸出的机理，以产酸和耐酸能力作为手段和目标，对传统的诱变育种方法加以改进，在诱变育种的同时，对细菌施加持续的选择压力，从而定向、高效的筛选出针对铁闪锌矿具有高浸出活性的菌株，通过本技术能使筛选出的菌株在闪锌矿浸出24天后，锌离子浓度提高15－20％；达到80％的锌浸出率的时间缩短4－6天。

主权项

1.从嗜酸喜温硫杆菌中快速选育具有高效浸出铁闪锌矿菌株的方法，其特征在于：将嗜酸喜温硫杆菌在质量体积比为5％闪锌矿粉末的培养基连续传代活化3-5次，过滤、含菌滤液离心收集活化的对数生长期的细菌作为出发菌株；用无菌生理盐水洗2-3次，经显微计数后调整细菌浓度至107-108/ml，取3ml菌液置于开盖的平面上，磁力搅拌器对菌液进行搅拌；采用30w的紫外灯于30cm处照射菌液70-100s，然后，于红灯下，将处理后的细菌菌液分别稀释到10-4、10-5后涂布到含平皿培养基的平皿上培养，培养至形成单菌落；将上述生长速度快的菌落接种到浸矿培养基的摇瓶中液体培养，连续传代2-3次和每次控制pH不超过1.8的选择压力，显微计数，选取活力强的菌株进行下一轮的微波诱变；采用功率为650w，频率为2450MHz的微波炉对菌株处理8-12s，处理后将菌液涂布于平皿培养基上筛选生长快的菌株接种到含浸矿培养基的摇瓶中，持续施加pH不超过1.8的选择压力，传代2-3次，得目的菌株；所述平皿培养基的组成为：2.5-4g/l的(NH4)2SO4；3-4g/l的Na2SO4.10H2O；0.1g/l的KCl；0.05g/l的K2HPO4；0.5g/l的MgSO47H2O；0.01g/l的Ca(NO3)2；8-11g/l Na2S2O3；0.1g/l酵母浸出粉；20-25g/l的琼脂粉，溶液pH1.5-1.8；所述浸矿培养基的组成为：2.5-4g/l的(NH4)2SO4；3-4g/l的Na2SO4.10H2O；0.1g/l KCl；0.05g/l的K2HPO4；0.5g/l的MgSO47H2O；0.01g/l的Ca(NO3)2；4-5g/l的Na2S2O3；0.1g/l酵母浸出粉；45-50g/l的-200目的铁闪锌矿粉，溶液pH1.5-1.8。