[发明专利]一种化学试剂修饰木瓜蛋白酶的方法无效
| 申请号： | 200810035959.3 | 申请日： | 2008-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN101250514A | 公开（公告）日： | 2008-08-27 |
| 发明（设计）人： | 朱利民;薛勇;聂华丽;李树白;张玉高;周立明 | 申请（专利权）人： | 东华大学;广东溢达纺织有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/96 | 分类号： | C12N9/96 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 | 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 地址： | 201620上海市松*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种化学试剂修饰木瓜蛋白酶的方法，步骤包括(1)用化学试剂丁二酸酐修饰木瓜蛋白酶；(2)通过对温度、pH和洗涤剂的单因素实验比较修饰过的木瓜蛋白酶与未经修饰的木瓜蛋白酶的酶活。该方法快速、简便、廉价，修饰过的木瓜蛋白酶与未经修饰的木瓜蛋白酶相比有较高的酶活。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 化学试剂 修饰 木瓜蛋白酶 方法 | ||
【主权项】：
1.一种化学试剂修饰木瓜蛋白酶的方法，包括下列步骤：(1)用化学试剂丁二酸酐修饰木瓜蛋白酶将化学试剂丁二酸酐溶解在双蒸水中配成100μg/ml～200μg/ml丁二酸酐溶液，取5～10ml加入到40～50ml浓度为5mg/ml～10mg/ml的木瓜蛋白酶溶液中，25～30℃下搅拌1～2个小时，得到修饰过的木瓜蛋白酶溶液；(2)在0.1～0.2ml修饰过的木瓜蛋白酶溶液中加入0.7～1.4ml浓度为0.04～0.06M pH5.0～9.0Tris-HCl缓冲液，调温度至40℃～80℃，加入0mg/ml～20mg/ml洗涤剂进行反应20～40分钟；(3)在0.1～0.2ml浓度为5mg/ml～10mg/ml的木瓜蛋白酶溶液中加入0.7～1.4ml浓度为0.04～0.06M的Tris-HCl缓冲液，调温度至40℃～80℃，加入0mg/ml～20mg/ml洗涤剂进行反应20～40分钟；(4)测试酶活性。
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