[发明专利]一种检测石蜡标本DNA甲基化的方法有效
申请号: | 200810038455.7 | 申请日: | 2008-06-03 |
公开(公告)号: | CN101285097A | 公开(公告)日: | 2008-10-15 |
发明(设计)人: | 卫立辛;张春东;蒋国成;程越;郭献灵;吴孟超 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 上海德昭知识产权代理有限公司 | 代理人: | 丁振英 |
地址: | 200135*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种检测石蜡标本DNA甲基化的方法,包括如下步骤:石蜡切片脱蜡、细胞裂解、DNA亚硫酸氢钠修饰、脱磺化、修饰后的DNA纯化、PCR扩增和检测分析,整个修饰过程DNA没有从切片中抽提出来,DNA修饰、脱磺化等操作均在细胞内进行,不仅节省了时间,而且避免了因酚氯仿抽提过程中DNA的反复沉淀、溶解转移而造成的DNA损失和断裂,还有利于环境保护。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 石蜡 标本 dna 甲基化 方法 | ||
【主权项】:
1、一种检测石蜡标本DNA基因甲基化的方法,包括如下步骤:石蜡切片脱蜡、细胞裂解、DNA亚硫酸氢钠修饰、脱磺化、修饰后的DNA纯化、PCR扩增和检测分析,其特征在于先将石蜡标本切片固定在载玻片或过滤柱上,直接依次进行脱蜡、酒精水化、亚硫酸氢钠修饰、脱磺化处理,再用裂解液和蛋白酶K消化后从细胞中释放出DNA修饰产物,纯化后用作PCR模板。
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