[发明专利]一种洋葱假单胞菌基因工程菌的构建方法无效
| 申请号： | 200810048124.1 | 申请日： | 2008-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN101358195A | 公开（公告）日： | 2009-02-04 |
| 发明（设计）人： | 闫云君;杨江科;刘云;贾彬;徐莉 | 申请（专利权）人： | 华中科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12N15/55;C12N15/56;C12N15/63;C12N15/78;C12N1/21;C12R1/38 |
| 代理公司： | 华中科技大学专利中心 | 代理人： | 曹葆青 |
| 地址： | 430074湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供一种洋葱假单胞菌基因工程菌的构建方法，将T7 RNA聚合酶基因替换洋葱假单胞菌G63基因组中脂肪酶及其伴侣基因，使T7 RNA聚合酶基因整合到洋葱假单胞菌基因组中并位于脂肪酶启动子的调控之下。然后将洋葱假单胞菌脂肪酶及其伴侣基因克隆到含有T7启动子和LacI阻遏蛋白的表达质粒中，最后把质粒导入洋葱假单胞菌重组菌中得到洋葱假单胞菌脂肪脂肪酶超级工程菌。本发明对洋葱假单胞菌G63进行基因改造，获得了的超级工程菌基具有较高的表达量和催化活力，并且具有较好的低碳醇耐受性以及耐高温性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 洋葱 假单胞菌 基因工程 构建 方法 | ||
【主权项】：
1、一种洋葱假单胞菌基因工程菌的构建方法，具体如下：(1)采用同源重组方法去除洋葱假单胞菌G63基因组中原有的脂肪酶基因及其伴侣基因，同时导入T7 RNA聚合酶基因，获得能够表达T7 RNA聚合酶的洋葱假单胞菌重组菌；(2)将目的基因克隆到含有T7启动子和LacI阻遏蛋白的表达质粒中；(3)将表达质粒导入洋葱假单胞菌重组菌，得到洋葱假单胞菌基因工程菌。
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