[发明专利]一种利用工程大肠杆菌制备游离脂肪酸的方法无效
申请号: | 200810057895.7 | 申请日: | 2008-02-20 |
公开(公告)号: | CN101514351A | 公开(公告)日: | 2009-08-26 |
发明(设计)人: | 咸漠;杨建明;徐鑫;张磊;孟鑫;李强 | 申请(专利权)人: | 青岛生物能源与过程研究所 |
主分类号: | C12P7/64 | 分类号: | C12P7/64;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 | 代理人: | 周长兴 |
地址: | 266071山东省青岛*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 一种利用工程大肠杆菌制备游离脂肪酸的方法,步骤为:A)将工程大肠杆菌按0.5-1.5%的接种量接种到400-500mL内含30-50μg·mL-1的卡那霉素或氨苄青霉素的LB液体培养液中,35-37℃,200-250rpm条件下进行培养至OD600约为0.4-0.6时,再加入诱导剂IPTG至终浓度0.8-1mmol·L-1,继续培养3-24小时,诱导表达目的蛋白;培养液在8000-1000rpm条件下,离心5-10分钟,取上清液;B)发酵上清液,正己烷萃取,发酵液∶正己烷=1∶2-4(V/V),减压浓缩,制得游离脂肪酸。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 工程 大肠杆菌 制备 游离 脂肪酸 方法 | ||
【主权项】:
1、一种利用工程大肠杆菌制备游离脂肪酸的方法,步骤为:A)将工程大肠杆菌按体积比0.5-1.5%的接种量接种到400-500mL内含30-50μg·mL-1的卡那霉素或氨苄青霉素的LB液体培养液中,35-37℃,200-250rpm条件下进行培养至OD600约为0.4-0.6时,再加入诱导剂IPTG至终浓度0.8-1mmol·L-1,继续培养3-24小时,诱导表达目的蛋白;培养液在8000-1000rpm条件下,离心5-10分钟,取上清液;B)发酵上清液,正己烷萃取,发酵液∶正己烷的体积比=1∶2-4(V/V),减压浓缩,制得游离脂肪酸。
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