[发明专利]假高粱及其近似种单粒种子DNA快速提取方法无效
| 申请号： | 200810072359.4 | 申请日： | 2008-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN101748174A | 公开（公告）日： | 2010-06-23 |
| 发明（设计）人： | 郭琼霞;黄娴;虞赟;黄振;沈建国;黄可辉 | 申请（专利权）人： | 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34;C12N15/10;C07H21/04;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 350003 福建省*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从单粒假高粱及其近似种单粒种子中直接快速提取DNA的方法。从假高粱或其近似种单粒种子直接提取DNA，所得的质量与用幼苗叶片提取的DNA相比，无论从OD值计算所得的纯度还是从电泳验证的结果来看均没有显著差异，且经检验符合作为PCR扩增模板的条件。本发明简化了从假高粱及其近似种单粒种子中提取DNA的步骤，缩短了提取DNA的时间，并且采用了从单粒种子中直接提取DNA的方法，略去了发芽过程，大大节省了时间，在利用DNA指纹图谱进行品种真实性鉴定中具有重要的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 高粱 及其 近似 种单粒 种子 dna 快速 提取 方法 | ||
【主权项】：
假高粱及其近似种单粒种子直接快速提取DNA的方法，包括如下步骤：(1)取假高粱或其近似种单粒成熟种子，经液氮速冻后研磨至粉末；(2)往前述粉末中，先后加入TES和蛋白酶K，55-60℃温育；(3)加入浓度为1.4mol/LNaCl，然后，加入1/10体积10％CTAB，温育；(4)往步骤(3)加入1体积的氯仿∶异戊醇，氯仿与异戊醇的体积比为24∶1，混匀，冰育之后充分离心；(5)取前述离心之后上清液，加入适量NH4AC，冰育之后充分离心；(6)取前述(5)中离心之后的上清液，加0.55体积异丙醇沉淀DNA，立即充分离心，若无DNA团出现，立即将离心管置于冰上；(7)弃步骤(6)的上清液，乙醇洗沉淀，干燥后溶解于TE中。
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