[发明专利]一种苹果属植物蛋白质双向电泳方法无效
| 申请号： | 200810104851.5 | 申请日： | 2008-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN101260146A | 公开（公告）日： | 2008-09-10 |
| 发明（设计）人： | 韩振海;王晶莹;许雪峰;李天忠;王忆 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C07K1/26 | 分类号： | C07K1/26 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人： | 关畅;任凤华 |
| 地址： | 100094*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种苹果属植物蛋白质双向电泳方法。该方法包括以下步骤：1)将植物材料在液氮中研碎，加入－20℃预冷的含有10g/100ml的三氯乙酸和0。07ml/100ml的β－巯基乙醇的丙酮溶液继续研磨成匀浆，－20℃放置1h，然后12000rpm离心15min，保留沉淀；2)向沉淀中加入4倍沉淀体积的含有0.07ml/100ml的β－巯基乙醇的丙酮溶液，混匀－20℃放置11，然后12000rpm离心15min，保留沉淀；3)重复步骤2)6次，得到总蛋白；4)对步骤3)的总蛋白进行等电聚焦电泳，蛋白质上样量为300ug/170mm胶条，然后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳结束后进行银染。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 苹果 植物 蛋白质 双向 电泳 方法 | ||
【主权项】：
1、一种苹果属植物蛋白质双向电泳方法，依次包括以下步骤：1)将苹果属植物材料在液氮中研碎后，向所述植物材料中加入-20℃预冷的含有10％的三氯乙酸和0.07％的β-巯基乙醇的丙酮溶液继续研磨成匀浆，-20℃下放置1h，然后12000rpm离心15min，弃上清，保留沉淀；2)向所述沉淀中加入是所述沉淀的4倍体积的含有0.07％的β-巯基乙醇的丙酮溶液，混匀后，放置于-20℃1h，然后12000rpm离心15min，弃上清，保留沉淀；3)重复步骤2)6次，得到苹果属植物蛋白质；4)对步骤3)的苹果属植物蛋白质先进行等电聚焦电泳，然后再沿其垂直方向进行聚丙烯酰胺凝胶电泳；所述等电聚焦电泳中，蛋白质上样量为300ug/170mm胶条，所述聚丙烯酰胺凝胶电泳中采用的染色方法是银染；所述百分数均为质量百分含量。
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