[发明专利]一种提高小麦成熟胚再生率的培养基及其根癌农杆菌转化方法

摘要

本发明公开了一种提高小麦成熟胚再生率的根癌农杆菌介导的转化方法及其专用培养基。本发明所提供的提高小麦成熟胚再生率的根癌农杆菌介导的转化方法，包括下述步骤：1)将小麦种子灭菌后在无菌水中浸泡15－18小时，将浸泡后的小麦种子上的成熟胚刮碎后接种于预培养的培养基中，23－25℃的培养温度下黑暗培养7天；2)用目的根癌农杆菌侵染经过步骤1)处理的小麦成熟胚、进行共培养，将目的根癌农杆菌中的目标基因导入小麦成熟胚。利用上述农杆菌介导的转化方法将外源基因导入小麦中，经测定，用本发明的培养基及其转化方法，小麦成熟胚再生率得到提高。

主权项

1、根癌农杆菌介导的转化小麦成熟胚用培养基，是含有MS基本培养基的大量元素、MS基本培养基的微量元素、MS基本培养基的铁盐、B5基本培养基的维生素、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、AgNO3、AS、MgCl2、半胱氨酸、维生素C、水解酪蛋白、谷氨酰胺和Dicamba的固体培养基，所述培养基中葡萄糖的浓度为10-15g/L，所述培养基中甘露醇的浓度为0-15g/L，所述培养基中的山梨醇的浓度为0-15g/L，所述培养基中AgNO3的浓度为0-8mg/L，所述培养基中AS的浓度为0-40mg/L，所述培养基中MgCl2的浓度为0-1.75g/L，所述培养基中半胱氨酸的浓度为0-40mg/L，所述培养基中维生素C的浓度为0-100mg/L，所述培养基中水解酪蛋白的浓度为0-100mg/L，所述培养基中谷氨酰胺的浓度为0-500mg/L，所述培养基中Dicamba的浓度为1-3mg/L。