[发明专利]一种定量测定血浆中同型半胱氨酸的方法无效

专利信息
申请号: 200810113095.2 申请日: 2008-05-27
公开(公告)号: CN101592642A 公开(公告)日: 2009-12-02
发明(设计)人: 张严源;于多;王燕;徐希平 申请(专利权)人: 北京华安佛医药研究中心有限公司;深圳奥萨医药有限公司
主分类号: G01N30/06 分类号: G01N30/06;G01N30/26
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摘要: 发明涉及一种定量测定血浆中同型半胱氨酸的方法,包括:(1)血标本处理:血浆中加入2.5mmol/L N-乙酰半胱氨酸、0.6mol/L三丁基磷混匀,冰浴中放置30分钟,加入含有1mmol/L EDTA的0.6mol/L高氯酸。混匀,室温放置10分钟,10000rpm离心5分钟,吸取上清液,加入1.55mol/L NaOH、含有4mmol/L EDTA的0.125mol/L硼酸缓冲液、1mg/ml SBD-F,混匀后于60℃水浴中放置1小时,冰浴冷却后,进样。(2)流动相的配制:2mol/L醋酸缓冲盐溶液35ml,加入甲醇(色谱纯)10~20ml,加水至1000ml,摇匀,过0.45μm微孔滤膜。(3)色谱条件:分析柱为C18色谱柱;流速为0.7~1.2ml/min;柱温为20~30℃;进样量15μl;荧光检测条件:激发波长390nm,发射波长470nm。属于医药领域。
搜索关键词: 一种 定量 测定 血浆 半胱氨酸 方法
【主权项】:
1.一种血浆中Hcy浓度的定量测定方法,包括:(1)血标本处理:血浆中加入2.5mmol/L N-乙酰半胱氨酸、0.6mol/L三丁基磷混匀,冰浴中放置30分钟,加入含有1mmol/L EDTA的0.6mol/L高氯酸,混匀,室温放置10分钟,10000rpm离心5分钟,吸取上清液,加入1.55mol/L NaOH、含有4mmol/L EDTA的0.125mol/L硼酸缓冲液、1mg/ml SBD-F,混匀后于60℃水浴中放置1小时,冰浴冷却后,进样;(2)流动相的配制:2mol/L醋酸缓冲盐溶液35ml,加入甲醇(色谱纯)10~20ml,加水至1000ml,摇匀,过0.45μm微孔滤膜;(3)色谱条件:分析柱为C18色谱柱;流速为0.7~1.2ml/min;柱温为20~30℃;进样量15μl;荧光检测条件:激发波长390nm,发射波长470nm。
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