[发明专利]微杆菌的固定化方法及其用于生产(－)γ－内酰胺的方法无效
| 申请号： | 200810113773.5 | 申请日： | 2008-05-30 |
| 公开（公告）号： | CN101285059A | 公开（公告）日： | 2008-10-15 |
| 发明（设计）人： | 郑国钧;郭晓燕;冯亮;王建军;林建东;曹燕萍 | 申请（专利权）人： | 北京化工大学 |
| 主分类号： | C12N11/04 | 分类号： | C12N11/04;C12N1/20;C12P41/00;C12P17/10;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京思海天达知识产权代理有限公司 | 代理人： | 刘萍 |
| 地址： | 100029北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 微杆菌的固定化方法及其用于生产(－)γ－内酰胺的方法属于手性领域。本发明的固定化方法：将聚乙烯醇和海藻酸钠混合后加热溶解，冷却至40℃以下后与微杆菌细胞混合均匀得到混合溶液；所述的微杆菌保藏号为CGMCC No.2350；将均匀混合有微杆菌细胞的聚乙烯醇－海藻酸钠溶液滴入含有氯化钙的硼酸饱和溶液中，形成珠体。用固定化细胞生产(－)γ－内酰胺的方法：将固定化细胞用生理盐水洗涤，得到生物催化剂；生物催化剂与2～20g/L(+/－)γ－内酰胺溶液混合，在25～50℃pH6.0～8.0条件下，200～220转/分钟振荡1～12小时后以10000转/分钟离心5分钟。通过手性HPLC测定得到固定化细胞转化消旋的γ－内酰胺得到(－)γ－内酰胺的ee值可达到93.66％。 | ||
| 搜索关键词： | 杆菌 固定 方法 及其 用于 生产 内酰胺 | ||
【主权项】：
1.一种微杆菌的固定化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将聚乙烯醇和海藻酸钠混合后加热溶解，冷却至40℃以下后与微杆菌细胞混合均匀得到混合溶液；所述的微杆菌Microbacteriumhydrocarbonoxydans保藏号为CGMCC No.2350；在该混合溶液中海藻酸钠浓度为10～30g/L，聚乙烯醇浓度为30～100g/L，微杆菌细胞浓度为5～20g/L；(2)将均匀混合有微杆菌细胞的聚乙烯醇-海藻酸钠溶液滴入含有氯化钙的硼酸饱和溶液中，形成珠体，即为固定化细胞；氯化钙在最终溶液中浓度为10～30g/L。
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