[发明专利]从畜禽血液中同时分离纤维蛋白原和免疫球蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种从畜禽血液中同时分离纤维蛋白原和免疫球蛋白的方法。具体步骤如下：1)制备血浆，取新鲜血液，离心，除去红细胞，得到血浆。2)无机盐沉淀，向血浆中加入无机盐达到一定浓度，产生沉淀后离心分离，沉淀即纤维蛋白原，取上清液后续分离。3)柱层析，用填充有混合模式吸附剂的层析柱分离上清液，收集洗脱峰。4)脱盐和干燥，将收集液脱盐后，冷冻干燥，得到纯度约70％的免疫球蛋白。本发明所开发方法的特色在于设计了一条新的分离工艺，可以同时从畜禽血液中分离出纤维蛋白原和免疫球蛋白，方法的关键在于从沉淀分离纤维蛋白原的上清液中直接提取免疫球蛋白，具有操作步骤简单，分离纯化因子高的优点。

主权项

1.一种从畜禽血液中同时分离纤维蛋白原和免疫球蛋白的方法，其特征在于包括如下步骤：1)制备血浆配置0.1M的柠檬酸钠溶液作为抗凝剂，将新鲜畜禽血液与抗凝剂按照9∶1的比例混合均匀，用离心机以2500～3000rpm转速离心10～20分钟，除去红细胞，得到血浆，置于-20～-40℃冰箱中备用；2)无机盐沉淀法分离纤维蛋白原将饱和无机盐溶液加入到步骤1)得到的新鲜血浆中，使无机盐的饱和度达到16～22％，室温下静置30分钟，待沉淀完全，用离心机以4000～5000rpm转速离心10～20分钟，收集沉淀为纤维蛋白原，得到上清液，为免疫球蛋白粗品溶液；3)混合模式吸附层析分离免疫球蛋白调节步骤2)得到的免疫球蛋白粗品溶液的pH至7～8，使免疫球蛋白粗品溶液与平衡缓冲液的pH相同，用0.2μm滤膜过滤后，上样到填充有混合模式吸附剂的层析柱中，平衡缓冲液冲洗，洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱峰，得到免疫球蛋白溶液；4)脱盐和干燥将步骤3)得到的免疫球蛋白溶液脱盐，冷冻干燥，得到免疫球蛋白。