[发明专利]一种氨基糖苷类药物通用人工抗原的合成方法

摘要

一种氨基糖苷类药物的通用人工抗原的合成方法，属于生物化工技术领域。本发明以新霉胺为半抗原，用戊二醛法将其与载体蛋白BSA偶联，用凝胶电泳法测定偶联物的偶联比。本发明成功合成了新霉胺的人工抗原，合成步骤简洁，有效，完全可用于免疫分析中，为以后人们的研究提供了必需的人工抗原，可以满足国内对氨基糖苷类药物研究的需要。

主权项

1、一种氨基糖苷类药物的通用人工抗原的合成方法，其特征是以新霉胺为半抗原，用戊二醛法将其与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联，用凝胶电泳法测定偶联物的偶联比；(1)人工抗原的合成：控制新霉胺、戊二醛、牛血清白蛋白以摩尔比为150∶35∶1的比例反应，首先让半抗原新霉胺与牛血清白蛋白溶于0.1mol/L碳酸钠缓冲液室温混匀，逐滴加入现配的1％的戊二醛水溶液，温和搅拌反应15分钟后，反应液中加入硼氢化钠至终浓度为10mg/mL，然后置4℃下温孵1.5小时，即得人工抗原混合液；透析袋前处理：取10cm的透析袋，于沸水中煮沸5min，再用60℃的去离子水冲洗3min，保存在4℃去离子水中备用；将人工抗原混合液移入透析袋中，用2×2L的0.01M的pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液和2×2L的去离子水透析3天，最后使用冻干法将透析袋中的液体制成粉末，即得到人工抗原：7-新霉胺-牛血清蛋白；(2)人工抗原的鉴定：人工抗原采用凝胶电泳法鉴定其偶联结果，利用标准蛋白得到标准曲线，计算其偶联比。