[发明专利]海藻酸钠－壳聚糖微囊固定腈水合酶菌株的方法

摘要

海藻酸钠－壳聚糖微囊固定腈水合酶菌株的方法，它涉及一种固定腈水合酶菌株的方法。本发明解决了现有方法固定的腈水合酶菌株酶活损失大、反应批次少的问题。本发明方法如下：将海藻酸钠、腈水合酶菌悬液、硅藻土和活性炭混合均匀后滴入CaCl₂溶液中，得到小球后在温度为4℃的条件下将小球固化24h，再滤出小球，然后将滤出的小球放入壳聚糖壳聚糖醋酸溶液中覆膜。本发明得到的海藻酸钠－壳聚糖微囊具有最高的相对酶活，可达91.6％，比采用海藻酸钠包埋法得到的海藻酸钠－壳聚糖微囊的相对酶活提高了23.3％。本发明得到的腈水合酶菌株可实现10批次反应，与海藻酸钠包埋法相比本发明具有更好的操作稳定性、连续性，可实现工业化连续生产。

主权项

1、一种海藻酸钠-壳聚糖微囊固定腈水合酶菌株的方法，其特征在于海藻酸钠—壳聚糖微囊固定腈水合酶的方法如下：一、将质量浓度为3.0％-4％的海藻酸钠、浓度为50000cfu/ml～80000cfu/ml的腈水合酶菌悬液、硅藻土和活性炭混合均匀，然后将混合溶液滴入质量浓度为3.5％-8％的CaCl2溶液中，得到直径为2.5～3.5mm的小球后，在温度为4℃的条件下将小球固化24h，再滤出小球；二、将经过步骤一得到的小球置于醋酸体积分数为2％、壳聚糖质量分数为1.2％-1.8％的壳聚糖醋酸溶液中覆膜20min～40min，然后滤出小球，再用蒸馏水洗涤3次，即得海藻酸钠—壳聚糖微囊；其中步骤一中浓度为50000cfu/ml～80000cfu/ml的腈水合酶菌悬液与质量浓度为3.0％-4％的海藻酸钠的体积比为1∶10～30，浓度为50000cfu/ml～80000cfu/ml的腈水合酶菌悬液的体积与硅藻土的质量比为1ml∶0.06g～0.1g，浓度为50000cfu/ml～80000cfu/ml的腈水合酶菌悬液的体积与活性炭的质量比为1ml∶0.015g～0.025g。