[发明专利]一种四季三黄丸的质量检测方法

摘要

本发明属于中药技术领域，具体说是涉及一种四季三黄丸的质量检测方法，本发明通过显微鉴别大黄、黄柏、黄芩、栀子；采用薄层色谱法鉴别大黄、黄柏、黄芩、栀子；采用高效液相法测定大黄素、大黄酚的总量，通过建立明确专属性强的鉴别方法，能够更好的从药材、投料控制药物的质量，进一步完善原有质量检验方法及标准。保证了患者服用的有效性，安全性，克服现有技术的弊端，提高产品的质量、疗效、生物利用度，更好地满足医疗的需要。

主权项

1一种四季三黄丸的质量检测方法，其特征在于：该方法中的a鉴别方法b含量测定是以下方法的一种或几种：a鉴别：(1)取四季三黄丸，研细，置显微镜下观察，可见各药材的特征结构；(2)取四季三黄丸1～5g，研细，加甲醇5～50ml，加热回流20～60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水5～30ml，盐酸0.5～5ml，加热回流10～60分钟，立即冷却，加乙醚10～50ml提取，分取乙醚层，蒸干，残渣加三氯甲烷0.5～5ml使溶解，作为供试品溶液，另取大黄对照药材1～5g，同法制成对照药材溶液，再取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5～3mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法中国药典2005年版一部附录VI B试验，吸取上述三种溶液各2～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚60～90℃-甲酸乙酯-甲酸5～40∶2～10∶0.5～5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；(3)取四季三黄丸1～5g，研细，加甲醇5～50ml，置水浴中加热回流10～30分钟，滤过，滤液置水浴上浓缩使成0.5～3ml，作为供试品溶液，另取黄柏对照药材0.2～2g，同法制成对照药材溶液，再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5～3mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水2～20∶1～6∶0.5～5∶0.5～5∶0.2～2为展开剂，置用氨蒸气预饱和5～30分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(4)取四季三黄丸2～10g，研细，加甲醇10～50ml，加热回流0.5～1.5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水5～30ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调节pH值至1～2，用乙酸乙酯提取2次，每次5～30ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇0.5～2ml使溶解，作为供试品溶液，另取黄芩对照药材0.5～3g，同法制得对照药材溶液，再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5～5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法中国药典2005年版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液及对照药材溶液各1～10μl，对照品溶液5～20μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水2～10∶1～8∶0.5～5∶0.5～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)取四季三黄丸5～50g，研细，置索氏提取器中，加石油醚60～90℃加热回流0.5～1.5小时，弃去石油醚液，再加三氯甲烷加热回流提取0.5～2小时，弃去三氯甲烷液，再加乙醇回流提取0.5～2小时，乙醇提取液蒸干，残渣加乙醇2～10ml使溶解，作为供试品溶液，另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5～2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法中国药典2005年版一部附录VI B试验，吸取上述两种溶液各2～20μl分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水5～20∶3～15∶1～5∶0.2～2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b含量测定：色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.2％磷酸溶液85∶15为流动相，检测波长254nm，理论板数按大黄素峰和大黄酚峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备：取大黄素对照品、大黄酚对照品，精密称定，加乙腈制成每1ml含大黄素20～100μg、大黄酚50～200μg的混合溶液，即得；供试品溶液的制备：取四季三黄丸研细，取约0.5～5g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加乙醇10～50ml，密塞，称定重量，置水浴回流10～60分钟，放冷，用乙醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液5～40ml，置锥形瓶中，挥去乙醇，加20％硫酸溶液5～20ml，超声处理功率160W，频率40kHz2～10分钟，再加三氯甲烷10～50ml，置水浴中加热回流水解30～100分钟，立即冷却，移置分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷提取3次，每次5～50ml，合并三氯甲烷液，加入无水硫酸钠1～10g，脱水，滤过，用少量三氯甲烷洗涤残渣，合并，回收三氯甲烷溶剂至干，残渣加乙腈溶解，并转移至5～50ml量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，滤过，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～50μl，注入液相色谱仪，测定，即得；每克含大黄以大黄素和大黄酚总量计，不得少于2.2mg。