[发明专利]一种组织工程支架材料接种细胞的简便方法

摘要

本发明提供了一种在多孔生物工程支架材料上，实现种子细胞三维均匀接种的简便有效的方法。其特征是使用临床常用的灭菌注射器为接种工具，将所需的生物支架材料从注射器后部放入，然后吸入所需接种的相应的细胞数量的细胞悬液。注射器内预留一定量空气，封闭注射器口，回抽注射器，利用形成的负压使细胞悬液渗透入多孔材料的空隙内，实现种子细胞在支架材料内的初期均匀分布接种。本发明方法与现有的组织工程实践中，实现支架材料初期三维均匀接种方法相比，不需要花费大量资金购买专门的仪器，简便易行，可以取得专门设备相似的初期三维均匀接种效果。并且由于负压作用时间短，压力小，不会损伤接种细胞。

主权项

一种生物材料实现初期三维均匀接种细胞的方法，它步骤包括：1)前期分离培养足够的所需接种的细胞，并且根据接种目的，调整适合的细胞悬液浓度，并且准备好所需接种细胞的支架材料，灭菌待用；2)根据支架材料的大小选择相应的接种工具：无菌注射器的规格；3)拔出注射器活塞后，将准备好的支架材料从注射器后部放入，放回注射器活塞柱，推出多余空气；4)从注射器开口处吸入准备好的细胞悬液，同时同抽活塞柱，细胞悬液量以刚好淹没支架材料为准，推出多余空气，在注射器内，除支架细胞悬液复合体外只保留1ml空气；5)堵住注射器口，回抽活塞柱，使注射器筒内空气增加到3ml，并且在此状态下维持5秒钟，如此反复回抽维持三次；6)拔出活塞柱，倒出多余细胞悬液，取出支架材料置于培养皿内，在37℃，含5％CO2细胞培养孵箱内静置2小时，待细胞完全贴付后加入所需培养基，或者直接将以接种支架材料填充于手术缺损部位。