[发明专利]一种快速诊断唐氏综合征的方法无效
申请号: | 200810152923.3 | 申请日: | 2008-11-11 |
公开(公告)号: | CN101492730A | 公开(公告)日: | 2009-07-29 |
发明(设计)人: | 岳天孚;张颖;史云芳;李晓洲;李岩;张秀玲;王侃;孙璐 | 申请(专利权)人: | 天津医科大学总医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 天津佳盟知识产权代理有限公司 | 代理人: | 廖晓荣 |
地址: | 300052*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明是一种扩增D21S1440、D21S11和PentaD STR基因座诊断唐氏综合征的方法。该方法是扩增21号染色体D21S1440、D21S11和PentaD STR基因座,测序胶检测扩增产物,通过对扩增产物条带及面积的分析达到诊断唐氏综合征的目的。本发明的方法与染色体核型分析相比具有以下优点:快速;灵敏度、特异度高;取材少;可以对大批量样本同时进行诊断,结果分析省时省力等。应用QF-PCR扩增STR基因座方法快速、精确度高、自动进样和结果数据化等优势,是大规模产前诊断唐氏综合征的理想工具。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 诊断 综合征 方法 | ||
【主权项】:
1、一种快速诊断唐氏综合征的方法,其特征在于所述方法包括:(1)用常规方法采集样本,于-20℃保存备用;所述样本是羊水样本、绒毛样本或外周血样本;(2)提取样本中的DNA,其中:外周血样本采用DNA提取试剂盒进行DNA提取;羊水样本或绒毛样本采用盐析法进行DNA提取;(3)选择与合成引物,其中:a.D21S1440引物序列:f-FAM-GAGTTTGAAAATAAAGTGTTCTGC;r-CCCCACCCCTTTTAGTTTTA;扩增产物为157~175bp;b.D21S11引物序列:f-FAM-GTGAGTCAATTCCCCAAG;r-GTTGTATTAGTCAATGTTCTCC;扩增产物为172~260bp;c.Penta D引物序列:f-FAM-GAAGGTCGAAGCTGAAGTG;r-CTTGTGTCCAGATTAAAGAATTCTT;扩增产物为398bp~433bp;(4)PCR扩增以提取的基因组DNA为模板,在9600PCR仪上进行扩增;反应体系为25μL~50μL,其中模板0.2~0.4μL其终浓度0.6ng,dNTPs 0.5μL~1.0μL其终浓度0.2mmol/L,Taq酶0.5μL~1.0μL其终浓度0.04U/μL,10×PCR buffer 2.5μL~5.0μL其终浓度1×PCR buffer,引物f-FAM 0.03μL~0.06μL其终浓度0.12μmol/L,引物r 0.03μL~0.06μL其终浓度0.12μmol/L,最后补充ddH2O至25μL~50μL;(5)PCR扩增产物的检测采用ABI PRISM 377测序电泳、GeneScan 3.1软件及核酸/蛋白凝胶图像分析管理系统分析扩增产物,对电泳条带进行峰面积定量检测。
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