[发明专利]Z-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的酶合成方法

摘要

本发明公开了一种Z-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的酶合成方法。该合成步骤包括：分别配制一定浓度的谷氨酰胺的水溶液和Z-丙氨酸甲酯或Z-丙氨酸乙酯或Z-丙氨酸苄酯的乙醇溶液，将两溶液混合，以木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶、菠萝蛋白酶或羧肽酶Y中的一种为催化剂，在酶的最适条件下，恒温、恒pH反应一定时间，所得溶液沸水浴灭酶，过滤除去沉淀物，滤液经干燥后得到Z-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粉末。本发明提供的酶合成方法具有反应过程环境友好、条件温和，反应物系简单、副反应少，产物无消旋问题、易分离，所用酶制剂廉价易得、生产成本低廉，且制备流程简便等诸多优点。

主权项

1. 一种Z-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的酶合成方法，其特征在于包括以下过程：(1)将谷氨酰胺溶于质量浓度为0.1mol/L的氯化钾水溶液中，配制成浓度为120～800mmol/L的谷氨酰胺溶液，按酶质量与谷氨酰胺质量比为1∶10～1∶20向该溶液中加入木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶、菠萝蛋白酶或羧肽酶Y中的一种，再添加氢氧化钠颗粒调节溶液pH为7.0～10.0，于温度35～60℃下电磁搅拌，并保温5～10min，制得谷氨酰胺与酶的混合液；(2)将Z-丙氨酸甲酯、Z-丙氨酸乙酯或Z-丙氨酸苄酯中的一种溶于无水乙醇中，配制成浓度为800～1200mmol/L的溶液；(3)将步骤(2)制备的溶液，按Z-丙氨酸甲酯或Z-丙氨酸乙酯或Z-丙氨酸苄酯与谷氨酰胺的摩尔比为1∶2～1∶20，逐滴加入步骤1制备的混合液中，在温度30～60℃和系统pH值为7.0～10.0下电磁搅拌，反应3～8小时，得到含有Z-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的溶液；(4)将步骤(3)中反应后所得溶液在沸水浴中加热5～8min，经孔径为0.45～0.8μm的滤膜或中速定性滤纸过滤，除去沉淀物，滤液于温度-50～-40℃下冷冻干燥或在加料流量5～10mL·min-1，入口温度160～180℃下喷雾干燥，得到Z-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的粉末。