[发明专利]青霉素与载体蛋白偶联产物和β-内酰胺类青霉素抗体制备的方法及用途

摘要

本发明提供一种青霉素与载体蛋白偶联产物、β-内酰胺类青霉素抗体制备的方法及用途。用本发明偶联的青霉素人工抗原免疫动物制备可用于食品中β-内酰胺类青霉素检测的抗体；免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合，用与载体蛋白偶联的β-内酰胺类抗生素作为包被抗原筛选阳性杂交瘤细胞、经细胞克隆获得能稳定传代并分泌抗β-内酰胺类抗生素抗体的杂交瘤细胞，并制备腹水单抗。利用制备的抗体建立了对β-内酰胺类抗生素具有高度特异性、灵敏性和精确性的直接竞争ELISA方法及免疫胶体金试纸条。本发明提供的青霉素与载体蛋白偶联产物及β-内酰胺类抗生素抗体的制备方法，可为快速检测食品中β-内酰胺类抗生素残留服务。

主权项

1. 一种青霉素与载体蛋白偶联产物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：a)将20-200mg青霉素钠盐、5-100mgN-羟基丁二酰亚胺和20-200mg碳化二亚胺加到1-10毫升超纯水中，在冰浴中搅拌10-50分钟；b)上述溶液中边搅拌边逐滴加入含10-100mg载体蛋白的超纯水1-10毫升，加毕在4-30℃搅拌反应3-20小时，合成青霉素-载体蛋白偶联产物；c)青霉素-载体蛋白偶联产物放入透析袋中，用0.01M pH7.2的磷酸盐缓冲液在4℃透析1-3天；d)透析后的青霉素-载体蛋白偶联产物进行紫外扫描，分析鉴定偶联产物及浓度测定，分装后于-20℃冰箱保存备用。