[发明专利]庆大霉素与载体蛋白偶联产物和庆大霉素抗体制备的方法及用途

摘要

本发明提供一种庆大霉素与载体蛋白偶联产物、庆大霉素抗体制备的方法及用途。用本发明偶联的庆大霉素人工抗原免疫动物制备可用于食品中庆大霉素检测的抗体；免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合，用与载体蛋白偶联的庆大霉素作为包被抗原筛选阳性杂交瘤细胞、经细胞克隆获得能稳定传代并分泌抗庆大霉素抗体的杂交瘤细胞，并制备腹水单抗。利用制备的抗体建立了对庆大霉素具有高度特异性、灵敏性和精确性的直接竞争ELISA方法及免疫胶体金试纸条。本发明提供的庆大霉素与载体蛋白偶联产物及庆大霉素抗体的制备方法，可为快速检测食品中庆大霉素残留服务。

主权项

1. 一种庆大霉素与载体蛋白偶联产物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：a)将20-650mg硫酸庆大霉素和10-200mg载体蛋白溶解于1-10毫升0.01MpH7.2的磷酸盐缓冲液中；b)上述溶液中边搅拌边逐滴加入1-10毫升含300-2000mg盐酸碳化二亚胺的超纯水溶液，加毕后在4-30℃搅拌反应1.5-20小时，合成庆大霉素-载体蛋白偶联产物；c)庆大霉素-载体蛋白偶联产物放入透析袋中，用0.01M pH7.2的磷酸盐缓冲液在4℃透析1-3天；d)透析后的庆大霉素-载体蛋白偶联产物进行紫外扫描，分析鉴定偶联产物及浓度测定，分装后于-20℃冰箱保存备用。