[发明专利]一种溶胶凝胶包埋固定化酶制备S型环戊烯酮的方法

摘要

本发明公开了一种溶胶凝胶包埋固定化酶制备S型环戊烯酮的方法。包括如下步骤：1)以有机硅烷试剂为前驱体，在酸或碱的催化作用下，与水发生反应，生成溶胶；2)加入含有酶粉的缓冲液，搅拌、静置老化、干燥后得到溶胶凝胶包埋固定化酶；3)采用该包埋固定化酶为催化剂在有机相中对环戊烯酮进行对映体拆分反应，得到S型环戊烯酮。其特征在于：所用的脂肪酶为Pseudomonas aeruginosa、Arthrobacter sp.以及Acinetobacter sp.；前驱体为γ-甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷或烷基三甲氧基硅烷，或其与正硅酸甲酯或正硅酸乙酯的混合物；环戊烯酮为烯丙醇酮或炔丙醇酮。本发明所涉及的固定化酶在环戊烯酮的拆分反应中，活力、稳定性及对映体选择性等均有显著提高。

主权项

1. 一种溶胶凝胶包埋固定化酶制备S型环戊烯酮的方法，其特征在于包括如下步骤：1)在总体积为1ml的有机硅烷前驱体中，加入0.5ml的去离子水，30μl的0.1mol/l的盐酸或氢氧化钠溶液，并在200～250rpm，0～10℃条件搅拌30min，形成均匀的溶胶；2)向溶胶中加入含有0.005～0.02g脂肪酶的缓冲液，缓冲液的浓度为0.03M，pH7.0～9.0，缓冲液用量为0.5～1ml；搅拌10～20min后，在100rpm条件下继续搅拌1～3h；在4～10℃条件下静置老化过夜，于25～35℃条件下真空干燥7～10天，研磨，得到包埋固定化脂肪酶；3)将浓度为0. 1～3mol/L的环戊烯酮、浓度为2～10mol/L的酰基供体、体积为5～10ml的溶剂混合，加入25mg的包埋固定化脂肪酶在转速为200～250rpm的摇床中进行反应；反应温度为30～50℃，得到S型环戊烯酮。