[发明专利]一种尿液中邻二羟基类代谢物谱的检测方法

摘要

本发明提供一种尿液中邻二羟基类代谢物谱的检测方法，采用苯硼酸固相萃取纯化富集含邻二羟基类代谢产物，用液质联用法测定该类代谢物特征谱。通过收集甲酸-甲醇水洗脱液，离心浓缩，残留物用水溶解，离心后分析。本发明为尿液检测邻二羟基类代谢物谱提供了新的方法，并为进一步发现新的乳腺癌疾病诊断标志物提供了基础。

主权项

1. 一种尿液中邻二羟基类代谢物谱的检测方法，其特征在于通过以下步骤实现：(1)样品预处理精密量取0. 8mL上清液加入0.06mL儿茶素内标溶液混匀后上样于经预处理的苯硼酸柱中，依次用0.25mol/L醋酸铵、50％甲醇溶液冲洗，弃去冲洗液，收集0.1mol/L甲酸—50％甲醇水洗脱液，30℃下离心浓缩挥干，残留物用0.2mL水溶解，离心后待分析；(2)采用液相色谱—质谱法测定色谱条件：采用C18键合的快速液相色谱柱，以乙腈-水-甲酸为流动相进行梯度洗脱，流动相流速为0.25mL/min，梯度程序为：0～10min，0～10％B；10～16min，10～40％B；质谱条件：采用m/z：200-600扫描检测模式，离子源温度：110℃，锥空气流速：30L/h，脱溶剂气流速：600L/h，脱溶剂气温度：350℃，毛细管电压：1.5kV，锥空电压：30V，RF lens：2.8，extractor：1。