[发明专利]发酵高稳定性透明质酸钠菌种的培育方法

摘要

本发明公开了一种高稳定性透明质酸钠菌种的培育方法，包括采用编号ATCC39920为兽疫链球菌，其特征是对编号为ATCC39920的兽疫链球菌进行菌种培养和发酵培养，重复上述步骤，如此反复试验200次，获得待发酵菌种；再在发酵培养剂中进行透明质酸钠发酵培养，发酵培养基在121摄氏度小灭菌20分钟，冷却后在36-37摄氏度，pH6.8-7.1下培养，通气量无限制，培养30小时进入后处理步骤，得到高稳定性透明质酸钠，在同样条件下用原来没有优化处理的菌种来发酵生产透明质酸钠，两者进行稳定性对照考察，本发明提供的透明质酸钠成品稳定性明显高于外来透明质酸钠样品。

主权项

1、一种高稳定性透明质酸钠菌种的培育方法，包括采用编号ATCC39920为兽疫链球菌，其特征是对编号为ATCC39920的兽疫链球菌进行菌种培养和发酵培养：第一：生产透明质酸钠的兽疫链球菌，在下述条件下进行长期培养优化；条件如下：高糖培育——单菌挑选——发酵试验步骤：日常生产用斜面菌种——摇瓶培养15小时——发酵培养30小时发酵时的糖浓度在10％，正常发酵的糖浓度在5％左右。配方如下：斜面和摇瓶％ 发酵配方％牛肉膏 1 1酵母粉 0.5 0.5谷氨酸钠 0.2 0.3蚕蛹氨基酸 0 0.2葡萄糖 0.5 6磷酸二氢钾 0.15 0.2氯化镁 0.05 0.05纯化水 100 100消泡剂 0.01 0.01培养基在121摄氏度小灭菌20分钟，冷却后在36-37摄氏度，PH6.8-7.1下培养，通气量无限制。发酵培养20小时后，在无菌操作下取样，在超净工作台划线，培养单菌落。再重复上述步骤，如此反复试验200次，获得待发酵菌种；第二：对所获得的待发酵菌种进行发酵，获得发酵的透明质酸钠，发酵生产条件如下：斜面和摇瓶％ 发酵配方％牛肉膏 1 1酵母粉 0.5 0.5谷氨酸钠 0.2 0.3蚕蛹氨基酸 0 0.2葡萄糖 0.5 10磷酸二氢钾 0.15 0.2氯化镁 0.05 0.05纯化水 100 100消泡剂 0.01 0.01培养基在121摄氏度小灭菌20分钟，冷却后在36-37摄氏度，PH6.8-7.1下培养，通气量无限制，培养30小时进入后处理步骤。